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fang2010

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[求助] 参比波长的设定已有6人参与

在文献中查到杨梅素的最大吸收波长是433nm，用安捷伦1290得到杨梅素标准品在433nm下的峰却是很大的负峰，是什么原因？我设置的参比波长是360nm,是不是因为参比波长设置的不合适？检测每一种物质的时候都要设置参比波长吗？参比波长应该根据什么来设定？望高手指点！希望回答的时候能简单明了，便于实际操作，专业术语太多，理解困难，即使理解了，恐怕也还是不会操作

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1楼2014-04-22 15:02:36

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axearmy

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【答案】应助回帖

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HPLC波长设置简明方法：
1. 使用紫外分光光度计或二极管阵列检测器扫描药物光谱，找到吸收峰波长和无吸收的波长
2. 以吸收峰或靠近吸收峰的波长作为检测波长，用无吸收或低吸收的波长作为参比波长

设置参比波长的意义：
参比波长和参比吸收值是用来扣除仪器和环境的影响的，以减少检测过程中的系统干扰和误差。
单波长检测器不需要设置，而是专门有一路光不经过流通池来作为参比。
二极管阵列检测器（包括安捷伦的多波长）是使用另一个没有被测物质干扰的波长来作为参比。