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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » miRNA表达载体构建的一些细节求助
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wqtc

新虫 (初入文坛)

[求助] miRNA表达载体构建的一些细节求助 已有2人参与

1.连接进质粒的部分看到有人直接用miRNA有人用pre-miRNA,请问一般是用什么（虽然觉得应该用pre）
2.看到一些实验步骤是从大肠杆菌提取的质粒不能直接用还得在酶切测序然后连接到载体，再酶切鉴定，是不是有些繁琐，也有人不用大肠杆菌就直接酶切+测序鉴定就直接用了，请问都可以吗
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1楼 2014-04-21 11:37:26
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银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wqtc(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-22 13:33:07
1.pre-miRNA。因为表达出来的要细胞内酶切才是最终miRNA
2.为什么还要多一步的酶切+鉴定？一般情况下后者就可以了。
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一切有为法，如露如闪电
2楼2014-04-21 14:27:00
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wqtc(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-22 13:33:19
miRNA细胞内的前体叫做pri-miRNA，pre-miRNA已经是中间产物了。
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3楼2014-04-21 15:50:44
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