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柠檬可乐星新虫 (小有名气)
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[求助]
PCR产物测序结果差 求分析 已有6人参与
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各位大神：我之前做了个PCR，电泳结果如下图（条带从左到右依次是1、2、3、4），1、2是18S，约1kb，3、4是28S，约700bp，其中1、3是同一个DNA模板，2、4是同一个的。我看主带清晰也挺亮的，就直接送华大测序了，结果出来没有一个成功的，华大反馈的原因是：1：测序失败，峰图质量差，可信序列仅100bp；2：杂合，多位点规则套峰；3：重复序列，重复序列后峰图变乱；4：重复序列，重复序列后峰图变乱。 我想请问：1、PCR结果像我这样的，测序结果却全部失败，正常吗？会是什么原因？测序公司的问题还是我做的物种的基因问题？ 2、搞不清楚他所谓的“重复序列”是什么情况，有知道的大虾帮忙分析一下吧。 3、像我这个情况做克隆后再测序管用吗？特别是“重复序列”的做克隆可以吗？ 跪求高手指点，感激不尽！！  图片1.png |
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12楼2014-04-12 21:43:43
2楼2014-04-10 16:11:03
d00614028
银虫 (小有名气)
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3楼2014-04-10 16:13:01
zh10246
铁杆木虫 (文坛精英)
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- 专业: 细胞外基质
4楼2014-04-10 16:29:06
