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400bp的DNA产物跑RT-qPCR可以用两步法吗？
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1，看书上写qPCR中两步法一般适用于片段较短的，100-200bp，我设计的引物跑出来的片段有400bp的，还能用两步法吗？ 2，另外问，上机的Tm提高0.3℃影响会很大不？ |
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