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汕头大学海洋科学接受调剂
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] WB 封闭液 tween 浓度 已有4人参与

有人说:   由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时最好使用较温和的Tween20,而且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好)。------------------这样 可以吗
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weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
永峰1230: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-04-09 21:05:33
我们是千分之一,效果不错
2楼2014-04-09 13:36:56
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永峰1230: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-09 21:05:27
恩,我们实验室一直用的是0.05% tween 20 in TBS。感觉blocking的时间长点会好一些。有些同事做过4度 blocking overnight,感觉相当不错……
Permanent head Damage
3楼2014-04-09 14:42:52
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huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永峰1230: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-09 21:05:18
0.05% Tween 20,在PBS中,配成5%的MPBST封闭1h即可
4楼2014-04-09 15:13:31
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永峰1230: 金币+2, 有帮助 2014-04-09 21:04:54
0.05% tween 效果没问题
5楼2014-04-09 16:54:33
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

酪蛋白的免疫印迹啥啥不是很清楚,我们做的WB的话,一抗我们是用1.5%BSA in TBST.没有用过除了牛奶和BSA之外的东西了……

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Permanent head Damage
10楼2014-04-12 14:06:21
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 21:43:25
请问,,你的  封闭液是  1。5% BSA吗?     封闭液 能重复使用吗?...

我们用的是3%的BSA做blocking。重复使用三次左右,但一般我们都用新鲜的……牛奶没重复使用过。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Permanent head Damage
14楼2014-04-13 09:16:19
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普通回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-04-09 14:42:52
恩,我们实验室一直用的是0.05% tween 20 in TBS。感觉blocking的时间长点会好一些。有些同事做过4度 blocking overnight,感觉相当不错……

请问,封闭液 ,我的不能用 5%脱脂牛奶, 除了BSA  还能用什么吗?   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢?谢谢谢谢
12
6楼2014-04-12 13:48:38
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by huiting410 at 2014-04-09 15:13:31
0.05% Tween 20,在PBS中,配成5%的MPBST封闭1h即可

请问,封闭液 ,我的不能用 5%脱脂牛奶, 除了BSA  还能用什么吗?   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢?谢谢谢谢
12
7楼2014-04-12 13:48:52
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by weskerZXC at 2014-04-09 13:36:56
我们是千分之一,效果不错

请问,封闭液 ,我的不能用 5%脱脂牛奶, 除了BSA  还能用什么吗?   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢?谢谢谢谢
12
8楼2014-04-12 13:48:59
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 意孤城_ at 2014-04-09 16:54:33
0.05% tween 效果没问题

请问,封闭液 ,我的不能用 5%脱脂牛奶, 除了BSA  还能用什么吗?   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢?谢谢谢谢
12
9楼2014-04-12 13:49:05
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