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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » WB 封闭液 tween 浓度
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-04-12 14:06:21
酪蛋白的免疫印迹啥啥不是很清楚，我们做的WB的话，一抗我们是用1.5%BSA in TBST.没有用过除了牛奶和BSA之外的东西了……

谢谢，，一抗 也按你们实验室的 来吧，，，请问，你们 封闭液是 1.5%BSA in TBST  还是 5%脱脂牛奶呢？
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12
11楼2014-04-12 18:38:04
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-04-12 14:06:21
酪蛋白的免疫印迹啥啥不是很清楚，我们做的WB的话，一抗我们是用1.5%BSA in TBST.没有用过除了牛奶和BSA之外的东西了……

请问，，你的　　封闭液是　　１。５％　ＢＳＡ吗？　　　　　封闭液　能重复使用吗？
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12
12楼2014-04-12 19:43:25
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weskerZXC

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 13:48:59
请问，封闭液 ，我的不能用 5%脱脂牛奶， 除了BSA  还能用什么吗？   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢？谢谢谢谢...

一抗稀释说明说上会说用什么，酪蛋白如果不能用脱脂牛奶只能用BSA了吧，但是听说背景挺深
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13楼2014-04-13 08:51:57
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sunrq516516

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 21:43:25
请问，，你的　　封闭液是　　１。５％　ＢＳＡ吗？　　　　　封闭液　能重复使用吗？...

我们用的是3%的BSA做blocking。重复使用三次左右，但一般我们都用新鲜的……牛奶没重复使用过。
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永峰1230
Permanent head Damage
14楼2014-04-13 09:16:19
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huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 13:48:52
请问，封闭液 ，我的不能用 5%脱脂牛奶， 除了BSA  还能用什么吗？   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢？谢谢谢谢...

一般都是一样的，二抗稀释当然也可以一样。
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15楼2014-04-13 10:42:08
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
???????:
15?: Originally posted by huiting410 at 2014-04-13 10:42:08
??????????????????????????????...

都用TBST???以???

[ ????С??????? ]
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12
16楼2014-04-13 11:39:53
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by huiting410 at 2014-04-13 10:42:08
一般都是一样的，二抗稀释当然也可以一样。...

都用TBST可以吗
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12
17楼2014-04-13 11:41:39
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
18楼2014-04-13 12:23:37
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意孤城_

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 13:49:05
请问，封闭液 ，我的不能用 5%脱脂牛奶， 除了BSA  还能用什么吗？   做的是 针对 酪蛋白的  免疫印迹----------一抗稀释液是不是要和  封闭液 一样呢？谢谢谢谢...

常用的就是这两个，一般选择脱脂牛奶 毕竟便宜些   如果你的不能用 就最好用BSA  也不是很贵
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19楼2014-04-13 13:10:08
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-04-13 09:16:19
我们用的是3%的BSA做blocking。重复使用三次左右，但一般我们都用新鲜的……牛奶没重复使用过。...

请问，，室温  1--2小时，，，室温 温度低  是不是要时间长一些呢？
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12
20楼2014-04-13 18:55:14
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