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蛋白质纯化 已有4人参与
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大家好，有几个问题向大家请教。 我的蛋白是短肽13KD,大肠表达，纯化流程是SP-HIC-Desalting-Q，由于这个蛋白不稳定，SP结果当蛋白含量高于6mg/ml时4度放置两天就会出现浑浊，HIC由于使用的NaCl（硫酸铵会导致蛋白沉淀），不会出现沉淀，而由于要过Q柱出去内毒素和核酸，所以要脱盐，当浓度高于1mg/ml在20mM PB中就会沉淀，很是头疼。 PS:1. 请问大家在这个实验流程中怎么不让它沉淀， 2. 上柱子的Buffer中是不是可以添加什么东西呢,尤其是脱盐过程，达到不沉淀的目的。 再次谢谢了，由于比较紧迫，请大家支支招吧。 |
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送红花一朵 
本人越觉得这个蛋白未来前景不怎么地，目前来看太不稳定了，关键不是咱们投资做这东西，有人愿意出钱搞，也只好做下去了，谢谢了。 
8楼2014-04-23 13:19:13
2楼2014-04-08 13:44:27
yingshi0703
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1677.8
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- 虫号: 1407909
- 注册: 2011-09-19
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2014-04-08 16:05:00
5楼2014-04-08 20:33:52
