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蛋白质纯化 已有4人参与
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大家好,有几个问题向大家请教。 我的蛋白是短肽13KD,大肠表达,纯化流程是SP-HIC-Desalting-Q,由于这个蛋白不稳定,SP结果当蛋白含量高于6mg/ml时4度放置两天就会出现浑浊,HIC由于使用的NaCl(硫酸铵会导致蛋白沉淀),不会出现沉淀,而由于要过Q柱出去内毒素和核酸,所以要脱盐,当浓度高于1mg/ml在20mM PB中就会沉淀,很是头疼。 PS:1. 请问大家在这个实验流程中怎么不让它沉淀, 2. 上柱子的Buffer中是不是可以添加什么东西呢,尤其是脱盐过程,达到不沉淀的目的。 再次谢谢了,由于比较紧迫,请大家支支招吧。 |
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送红花一朵
本人越觉得这个蛋白未来前景不怎么地,目前来看太不稳定了,关键不是咱们投资做这东西,有人愿意出钱搞,也只好做下去了,谢谢了。