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蛋白质纯化 已有4人参与
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大家好，有几个问题向大家请教。 我的蛋白是短肽13KD,大肠表达，纯化流程是SP-HIC-Desalting-Q，由于这个蛋白不稳定，SP结果当蛋白含量高于6mg/ml时4度放置两天就会出现浑浊，HIC由于使用的NaCl（硫酸铵会导致蛋白沉淀），不会出现沉淀，而由于要过Q柱出去内毒素和核酸，所以要脱盐，当浓度高于1mg/ml在20mM PB中就会沉淀，很是头疼。 PS:1. 请问大家在这个实验流程中怎么不让它沉淀， 2. 上柱子的Buffer中是不是可以添加什么东西呢,尤其是脱盐过程，达到不沉淀的目的。 再次谢谢了，由于比较紧迫，请大家支支招吧。 |
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leezz7楼2014-04-17 22:49:31
2楼2014-04-08 13:44:27
yingshi0703
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3楼2014-04-08 16:05:00
5楼2014-04-08 20:33:52