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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用什么方法判断某种细菌中是否含有某种酶？
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xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)

[求助] 用什么方法判断某种细菌中是否含有某种酶？ 已有2人参与

小虫最近在做关于细菌的实验，由于之前是学材料专业的，因此对生物不太懂，特意向各位大神请教。用什么方法可以判断某种细菌中是否含有某种酶呢？比如一般提到beta-半乳糖苷酶，首先想到的都是大肠杆菌。对于枯草芽孢杆菌，怎么样才能判断其中有beta-半乳糖苷酶？
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1楼 2014-03-31 16:35:40
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xiaoganghehe at 2014-04-01 19:28:09
菌液就是乳白色那种...

你可以试试，ONPG反应有酶活是黄色的，酶活更高一点是橘黄色的
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10楼2014-04-01 20:28:18
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoganghehe(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-31 17:39:53
你标题吓死人，
要是只想知道β-半乳糖苷酶活性，用X-Gal显色就可以了，分子克隆有吧？去看看。
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2楼2014-03-31 17:27:15
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xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-31 17:27:15
你标题吓死人，
要是只想知道β-半乳糖苷酶活性，用X-Gal显色就可以了，分子克隆有吧？去看看。

X-Gal指示beta-半乳糖苷酶活性我倒知道，现在想确定的是是否枯草中也有beta-半乳糖苷酶。如果X-Gal能显色，就能表明含有beta-半乳糖苷酶吗？
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3楼2014-03-31 19:00:48
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoganghehe(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-04-01 13:05:00
xiaoganghehe: 金币+2 2014-04-01 14:01:27
测酶活就好了吧，不同的酶测酶活方法不同，beta-galactosidase就用x-gal显色初步判断，一般x-gal显色了就表示有这个酶。
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4楼2014-04-01 10:03:25
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xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-04-01 10:03:25
测酶活就好了吧，不同的酶测酶活方法不同，beta-galactosidase就用x-gal显色初步判断，一般x-gal显色了就表示有这个酶。

好的，用ONPG显色可以吗？
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5楼2014-04-01 14:01:22
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xiaoganghehe: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2014-04-01 20:40:16
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoganghehe at 2014-04-01 14:01:22
好的，用ONPG显色可以吗？...

可以的，如果是测乳糖酶的话，0.2ml酶液+0.8mlONPG，如果变成黄色了，说明有酶活
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6楼2014-04-01 16:39:04
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xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-04-01 16:39:04
可以的，如果是测乳糖酶的话，0.2ml酶液+0.8mlONPG，如果变成黄色了，说明有酶活...

取菌液+ONPG，如果变黄色了，也能说明吗？
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7楼2014-04-01 17:49:59
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaoganghehe at 2014-04-01 17:49:59
取菌液+ONPG，如果变黄色了，也能说明吗？...

菌液得没颜色吧，我们是发酵以后取粗酶液的。我直接用菌液做过，但我的菌液颜色很淡，不影响显色。
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8楼2014-04-01 19:07:46
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xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-04-01 19:07:46
菌液得没颜色吧，我们是发酵以后取粗酶液的。我直接用菌液做过，但我的菌液颜色很淡，不影响显色。...

菌液就是乳白色那种
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9楼2014-04-01 19:28:09
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