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yumupeipei铜虫 (小有名气)
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一周前，复苏了一管甜菜夜蛾中肠脂肪体细胞，不知为何，细胞仍未出现贴壁现象。在倒置显微镜下观察时，细胞的外形特征较正常细胞并无异样，培养基中悬浮的细胞浓度很大，较活化时的透光率低，但培养瓶底物无贴壁的细胞出现（将瓶子竖立时，培养瓶底部的细胞也会随着培养液向下滑动 ），请问各位前辈，为何会出现这种情况？如何提高细胞的贴壁率？这批细胞还有必要传代吗？倘若传代的话是否按照悬浮细胞的方法传？谢谢！补充：培养基为sigma的Hink's TNM-FH昆虫培养基，外加10%的牛血清，100单位/ml的青链霉素，培养温度为27度。 |
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肖颖2009
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可以把冻存管放在一次性手套中，刚好可以放在一根手指的那个位置，裹好了再拿到外面的水浴锅里。原来我们细胞间也没有水浴锅，还不是拿到外面的水浴锅解冻的。解冻好之后，拿到细胞间前在手套上喷点75%的酒精，再取出冻存管到无菌操作台中，拧开前用沾有75%酒精的棉球对整个冻存管进行擦拭。擦拭完毕后拧开前在酒精灯火焰上稍微过一下盖子处。酒精棉不要太湿，不然在火焰上过的时候容易着火。只要注意规范操作是不会出现污染的。如果觉得冻存管从手套中取出来不方便，可以直接用剪刀剪开更好。祝你实验顺利~！ |
yumupeipei9楼2014-03-31 17:06:29
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yumupeipei
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4楼2014-03-25 14:51:52