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yumupeipei铜虫 (小有名气)
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一周前,复苏了一管甜菜夜蛾中肠脂肪体细胞,不知为何,细胞仍未出现贴壁现象。在倒置显微镜下观察时,细胞的外形特征较正常细胞并无异样,培养基中悬浮的细胞浓度很大,较活化时的透光率低,但培养瓶底物无贴壁的细胞出现(将瓶子竖立时,培养瓶底部的细胞也会随着培养液向下滑动 ),请问各位前辈,为何会出现这种情况?如何提高细胞的贴壁率?这批细胞还有必要传代吗?倘若传代的话是否按照悬浮细胞的方法传?谢谢!补充:培养基为sigma的Hink's TNM-FH昆虫培养基,外加10%的牛血清,100单位/ml的青链霉素,培养温度为27度。 |
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可以把冻存管放在一次性手套中,刚好可以放在一根手指的那个位置,裹好了再拿到外面的水浴锅里。原来我们细胞间也没有水浴锅,还不是拿到外面的水浴锅解冻的。解冻好之后,拿到细胞间前在手套上喷点75%的酒精,再取出冻存管到无菌操作台中,拧开前用沾有75%酒精的棉球对整个冻存管进行擦拭。擦拭完毕后拧开前在酒精灯火焰上稍微过一下盖子处。酒精棉不要太湿,不然在火焰上过的时候容易着火。只要注意规范操作是不会出现污染的。如果觉得冻存管从手套中取出来不方便,可以直接用剪刀剪开更好。祝你实验顺利~! |
9楼2014-03-31 17:06:29
yumupeipei
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2楼2014-03-25 08:30:23
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3楼2014-03-25 14:30:37
yumupeipei
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4楼2014-03-25 14:51:52














),请问各位前辈,为何会出现这种情况?如何提高细胞的贴壁率?这批细胞还有必要传代吗?倘若传代的话是否按照悬浮细胞的方法传?谢谢!
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yumupeipei
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