24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1536  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

无敌小莫

铜虫 (小有名气)

[求助] 双抗平板中长出了菌落,不知道是不是自己所要的重组菌 已有3人参与

自己做重组菌也做了好久了,一直没有做成功。目前在用的事PET32a质粒,这一次是目的基因和质粒酶切之后都没有做胶回收,用PCR产物纯化试剂盒纯化了下酒直接做了连接转化。筛选就是采用的氨苄和卡纳抗性筛选,在双抗平板上长出了菌落,初步P菌落PCR并没有得到想要的电泳条带。请问,如果不是我要的重组子,又会是什么呢?竟然还具有双抗性?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无敌小莫

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-03-17 23:18:23
摇菌后用菌液PCR看看,这个比菌落PCR效果好一点。我印象里pET系列的载体是单抗性的,怎么会用双抗啊!

目的基因和PET32a质粒重组连接了下,在双抗平板上就长出来了一些菌落。。
3楼2014-03-18 12:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-18 08:49:37
摇菌后用菌液PCR看看,这个比菌落PCR效果好一点。我印象里pET系列的载体是单抗性的,怎么会用双抗啊!
2楼2014-03-17 23:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

691806321

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌落PCR很不准确的,不确定因素太多。好多情况都是菌落PCR是阳性,酶切鉴定不是。建议挑几个菌落摇菌提质粒,酶切鉴定下,就算不是,也知道问题出在哪里,下次做时可以注意。此外,氨苄,卡纳抗性平板上长了,也不一定就是你要的重组菌,是杂菌的可能性也有。要具体看看菌落的形态。
4楼2014-03-18 14:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjjhhbbb

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很可能是杂菌,一般是菌落PCR鉴定是不是你要的目的基因,当然提质粒检测更准确
5楼2014-03-18 15:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297,工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 吉大计算机技术331分,英语六级,求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
信息提示
请填处理意见