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zc1384

金虫 (正式写手)

[求助] 请问下~~~关于PBS缓冲液与蛋白质静电屏蔽 已有1人参与

本人不是生物专业,有些问题不是很清楚。请不吝赐教。
PBS缓冲液的配方中一般加入137mM(8g/1000mL)氯化钠。这个氯化钠的浓度是不是固定的,若是氯化钠浓度高了,比如加到600mM是不是在PBS的使用上对蛋白或细胞等有影响。因为看到一篇文献,氯化钠浓度加到600mM,这样一来肯定会屏蔽了蛋白质上的电荷,浓度高了对蛋白质活性是否有影响?
不知道在实验中,PBS缓冲液中可不可以增加氯化钠的浓度。  自己不太懂,谢谢!
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ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zc1384: 金币+10, 有帮助, 谢谢~ 2014-03-18 11:13:06
磷酸盐缓冲液多种多样,不同的pH,钙镁离子等等的
我觉得PBS最主要的还是8的NaCl‰以及总含量10‰左右的盐度
我推测这个最初还是通过生理盐水的等渗液换算过来的
生理盐水也是10‰左右的(你要是在这个上面较真,那就没意义了)。
一般我们溶解蛋白类的东西很多都是用生理盐的水(PBS、D-hanks等等)的,主要是很多比较纯的蛋白在纯水里面几乎不溶(就比如胰蛋白酶)
蛋白等电点这个是个很奇妙的东西,盐度不合适正好碰到等电点了蛋白就直接析出来了。
PBS我们做细胞实验最多是用来调节等渗的,NaCl的量无特殊要求的话是固定的。至于其他实验我就不好说了,看具体情况了
3楼2014-03-17 11:34:42
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