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疯狂的麦子

无虫 (小有名气)

[求助] 关于植物电镜扫描 已有1人参与

想做植物电镜扫描。就是跟图中的差不多的,只是观察根部形态,就是想照个根的全横切面图,送检之前应该做什么准备工作么,电镜扫描不是透镜扫描。需要切片么,还是直接送材料。大概什么价位。知道的还望告知,谢谢!!
关于植物电镜扫描
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关于植物电镜扫描-1
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wanrufeng

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
疯狂的麦子: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-16 22:35:51
我做过花器官发生,是幼嫩花芽,只看表面,我是在昆明植物所做的,新鲜材料经FAA(甲醛:冰醋酸:70%酒精=5:5:90固定48h后,转入70%酒精处理2-5h, 再转入90%酒精脱水过夜,在光学显微镜下解剖,暴露所要观察的部分。剥离好的材料经乙醇-乙酸异戊酯系列脱水(体积比100%;3:1; 2:2;1:3; 100%,五等级,每级30min)。然后进行CO2临界点干燥,将标本粘台、喷金、扫描电镜下观察。
样品不宜太大太高,你观察的根横切成3-5mm厚即可,脱水到100%乙酸异戊酯时可长期保存,粘台照相需要自己参与。
2楼2014-03-16 14:16:38
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wanrufeng

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

样品很容易丢失,最还找PCR管,全部管用解剖针烧热穿孔(包括盖子),孔不能太大防止样品丢失,解剖完就放入PCR管内进行处理即可。CO2干燥时外面最好再用纱布包上,干燥后粘台即可,不可长期存放,干燥一次大约100元,照片平均20-30元一张,我照的多月40张,少的话会贵点。有疑问再联系。
3楼2014-03-16 14:26:04
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疯狂的麦子

无虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wanrufeng at 2014-03-16 14:26:04
样品很容易丢失,最还找PCR管,全部管用解剖针烧热穿孔(包括盖子),孔不能太大防止样品丢失,解剖完就放入PCR管内进行处理即可。CO2干燥时外面最好再用纱布包上,干燥后粘台即可,不可长期存放,干燥一次大约100元 ...

我做的根应该比较大一般不会丢失,我想着取到根之后横切一下,切的薄一点,然后固定一下,做到90%酒精脱水这一部。然后寄出去做。还是要做到100%乙酸异戊酯然后寄出去。其他的都让别人做行么?
4楼2014-03-16 22:35:27
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wanrufeng

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯狂的麦子 at 2014-03-16 22:35:27
我做的根应该比较大一般不会丢失,我想着取到根之后横切一下,切的薄一点,然后固定一下,做到90%酒精脱水这一部。然后寄出去做。还是要做到100%乙酸异戊酯然后寄出去。其他的都让别人做行么?...

你上面的图1看样象新鲜材料切后直接扫描的,因为有土壤颗粒,根毛及表皮是干瘪的,如果你要这样的图就不用固定和其他处理,寄出去就行。想保持原有形态的话最好固定48h后再切,然后处理。幼嫩组织要全部过程。你要买再联系一下扫描电镜工作人员。
5楼2014-03-17 02:20:21
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wanrufeng

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯狂的麦子 at 2014-03-16 22:35:27
我做的根应该比较大一般不会丢失,我想着取到根之后横切一下,切的薄一点,然后固定一下,做到90%酒精脱水这一部。然后寄出去做。还是要做到100%乙酸异戊酯然后寄出去。其他的都让别人做行么?...

你上面的图1好像是没固定直接切后扫描的,根毛和表皮失水变形了。如果你要观察比较老的组织,可以固定后切开,直接上台扫描即可,例如干燥叶片气孔观察。如果组织娇嫩易变形最好按照我提供的步骤来。你跟扫描电镜工作人员联系下,说不定他们有更好的办法。
6楼2014-03-17 02:29:20
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疯狂的麦子

无虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wanrufeng at 2014-03-17 02:20:21
你上面的图1看样象新鲜材料切后直接扫描的,因为有土壤颗粒,根毛及表皮是干瘪的,如果你要这样的图就不用固定和其他处理,寄出去就行。想保持原有形态的话最好固定48h后再切,然后处理。幼嫩组织要全部过程。你要 ...

嗯,我就是想看带着土的根,是不是不用处理只需要切一下直接送?我主要还是想从这个横切面的土上测量土和根的大小,就是大致看成同心圆的那种横切面,里面一小圈是根外面是土壤,然后测量大小圆半径。如果这样的话是不是要进行固定,使其保持不变。然后切了送?
7楼2014-03-17 18:36:40
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草溪河

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯狂的麦子 at 2014-03-16 22:35:27
我做的根应该比较大一般不会丢失,我想着取到根之后横切一下,切的薄一点,然后固定一下,做到90%酒精脱水这一部。然后寄出去做。还是要做到100%乙酸异戊酯然后寄出去。其他的都让别人做行么?...

取样后用锋利双面刀横切,保证切口整齐就行了,然后可以立即在4%戊二醛中进行固定,固定过程应该可持续一周左右,所以可以在这时邮寄,不过要注意戊二醛有毒。
8楼2014-03-19 08:41:44
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