| 查看: 2117 | 回复: 17 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
鬼羽帝魂木虫 (著名写手)
|
[求助]
关于重组克隆实验中遇到的比较奇怪的问题 已有3人参与
|
||
|
最近实验中遇到一个比较奇怪的问题： 在一个载体上用AscI+SmaI切下一片断，将目的基因连上（两端为AscI+SmaI）。目的基因是通过SOE-PCR做的，中间为SfiI酶切位点. 挑单克隆后，重组质粒要比原先的质粒小，而且SfiI切不开。或许有人说这是假阳性，我也知道，但奇怪的在下面。 我用载体上的另一个酶切位点SacI分别单酶切质粒与重组质粒，原先质粒可以切开线性化，而重组质粒却切不开。（两者反应条件一样） 在构建过程中，酶切位点SacI一直没有进行改动。 一位师兄说，可能载体制备的有问题，载体断开了。 我却觉得我重新做了3次都这样，是不是不是载体的问题？？？ 请各位分析一下，不胜感激。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 相似案例 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有292人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有用同源重组法进行基因克隆和载体构建的吗？
已经有8人回复
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2014-03-04 10:53:18
西门吹雪170
荣誉版主 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 92 (初中生)
- 贵宾: 0.982
- 金币: 27278.4
- 散金: 1072
- 红花: 40
- 沙发: 2
- 帖子: 3092
- 在线: 438.7小时
- 虫号: 1209807
- 注册: 2011-02-22
- 性别: MM
- 专业: 认知科学
- 管辖: 分子生物
2楼2014-03-03 22:21:45
liygmail
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 14357.4
- 红花: 5
- 帖子: 3410
- 在线: 820.3小时
- 虫号: 280786
- 注册: 2006-09-17
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2014-03-03 23:00:57
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2014-03-04 10:50:59
