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炜少

木虫 (正式写手)


[交流] 【有奖活动】~高效液相色谱仪应用有奖活动,仪器应用交流【金币放送,参与有奖】~

祝各位虫友:身体健康,完事如意。
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**********************************************
  友情提示:专业讨论贴,请勿灌水哦~


[ Last edited by 炜少 on 2014-3-3 at 15:28 ]
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炜少

木虫 (正式写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 北京秦方 at 2014-03-03 15:12:10
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2.出峰不正常。
那关注的只有检测器,色谱柱,样品,就不考虑泵了。
这个出峰问题实际很复杂,但是解决的方法也简单。
分析:为什么昨天正常,今天不正常?
    液相色谱有很大的不确定性,所以一般 ...

出峰不正常也可能与泵有关啊,泵的密封圈损坏或者流速不准确了,也会导致峰的改变的吧。
9楼2014-03-03 15:44:49
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北京秦方

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
液相色谱工作原理其实也不复杂,出现问题,首先要找到目标,然后在分析目标。
我大概提及几点。
1.压力为0。
     那关注的只有泵,无阻尼出液正常,有柱子不正常,那就是单向阀的问题。一般走甲醇乙腈这类的没这个现象,走含缓冲盐的甲醇-水很容易有这个现象。
分析:为什么单向阀效率会降低?
    流动相过滤不充分,2次水置放时间较长,缓冲盐析出等等。
解决方法:清洗单向阀,有两种方式,一种是拆下来放甲醇-异丙醇等溶剂里-超声;一种是把流动相换成甲醇等,大流速运行(拿掉柱子)。

2.出峰不正常。
4楼2014-03-03 15:01:50
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北京秦方

新虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
炜少: 金币+5, 很高兴虫友能分享自己的心得,希望您以后能多多参与,为虫友解决问题。 2014-03-03 15:42:20
继续楼上

2.出峰不正常。
那关注的只有检测器,色谱柱,样品,就不考虑泵了。
这个出峰问题实际很复杂,但是解决的方法也简单。
分析:为什么昨天正常,今天不正常?
    液相色谱有很大的不确定性,所以一般做分析,严谨的过程中还需要方法。我们分析一般会当天做完或者连续的做完,如用外标法测试一个样品,不会把上周的标样数据和今天的联系起来。
解决方法:排除法。
  一般实验室最少也会有两根以上的色谱柱,最简单的是换柱子和样品,如果还一样,那就检测器本身的问题了。排除仪器的老化,实验室温度的影响,除了关注波长,关注的是氘灯的问题。
   首先看波长,无论是进口还是国产检测器,多波长的,都是通过机械方式改变光栅的方向来改变波长的,时间长了,这个波长会有不准,所以的检测器都有波长校准的功能,不妨校准一下。
    再看灯能量,看静态基线,看噪声和漂移。如果很差,那就是灯的问题。

3.梯度洗脱不理想
5楼2014-03-03 15:12:10
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北京秦方

新虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
费姚永芬: 金币+5, 谢谢交流,欢迎常来分析版,期待您更多的分享 2014-03-04 12:41:19
继续楼上
3.梯度洗脱不理想
二元高压梯度,为什么会用到梯度,简单的答案就是为了更好的分析。
分析:为什么峰分离效果不如之前的好。
  两台泵按照一定的比例运行,如果有一台有故障,那么反映出来的不是压力为0,因为系统中压力处处相同,有一台泵正常就有压力。所以除了泵就是混合器的问题。
解决方案:排除测试,单独测试泵分别都正常,流动相、梯度表正常,色谱柱、样品正常、那就是混合器了。
   虽然混合器只是单单把两种液体混为一种,但是作用很大。如果有动态混合器的,可以试一试,开与不开的效果。混合器里大多有过滤的筛板和石英棉,这些是需要定期更换的。

4.出峰重现性不好。
6楼2014-03-03 15:23:05
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2014-03-03 11:34   回复  
2014-03-03 11:35   回复  
送红花一朵
炜少8楼
2014-03-03 15:32   回复  
[ Last edited by 炜少 on 2014-3-5 at 16:37 ]
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