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水晶之恋丹

金虫 (小有名气)

LD

[求助] HeLa细胞状态 已有3人参与

麻烦各位大神帮我看看我养的HeLa细胞,细胞里面有很多空泡,而且培养基中有很多黑色的东西,还能动,不知道是什么原因啊。师兄说有可能是支原体感染,谁能帮忙解释一下什么是支原体感染啊,要怎么处理呢?谢谢了
HeLa细胞状态
这个是没换液之前的细胞,培养基里很多黑色的东西.jpg


HeLa细胞状态-1
这几张是刚换完液之后照的,细胞里有很多空泡.jpg


HeLa细胞状态-2
这几张是刚换完液之后照的.jpg


HeLa细胞状态-3
这几张是刚换完液之后照的.jpg


HeLa细胞状态-4
这几张是刚换完液之后照的.jpg
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加油!
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旧西圆

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果培养基长势良好,没什么浑浊的话,会不会是黑胶虫污染?
2楼2014-02-27 21:25:19
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水晶之恋丹

金虫 (小有名气)

LD

引用回帖:
2楼: Originally posted by 旧西圆 at 2014-02-27 21:25:19
如果培养基长势良好,没什么浑浊的话,会不会是黑胶虫污染?

细胞长势很好,长得也很快,后面这四张照片是昨天传代的,今天就长得这么多,培养基也不浑浊,是澄清的,黑胶虫污染的话有哪些表现呢?要怎么处理呢?谢谢!
加油!
3楼2014-02-27 22:00:48
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旧西圆

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 水晶之恋丹 at 2014-02-27 22:00:48
细胞长势很好,长得也很快,后面这四张照片是昨天传代的,今天就长得这么多,培养基也不浑浊,是澄清的,黑胶虫污染的话有哪些表现呢?要怎么处理呢?谢谢!...

可以取一点出来试着加抗生素监测下,抗生素对黑胶虫是没用的。不过看你后面几张照片也不是很明显,注意勤换液吧。如果严重了就不好处理了,只能重新灭菌重做,主要是平时注意实验环境。
4楼2014-02-27 22:50:09
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 μm)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明:当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
一般是用抗生素杀灭或者专用支原体清除试剂或者支原体预防试剂。
5楼2014-02-28 10:04:56
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黄颖

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
支原体污染一般是看不见的,你可以用DAPI染色的方法确定是不是支原体污染,细胞出现空泡是因为状态不好,建议不要养太满,及时传代,穿几代后就会消失。
6楼2014-02-28 10:57:15
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