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水晶之恋丹

金虫 (小有名气)

LD

[求助] HeLa细胞状态 已有3人参与

麻烦各位大神帮我看看我养的HeLa细胞，细胞里面有很多空泡，而且培养基中有很多黑色的东西，还能动，不知道是什么原因啊。师兄说有可能是支原体感染，谁能帮忙解释一下什么是支原体感染啊，要怎么处理呢？谢谢了
HeLa细胞状态
这个是没换液之前的细胞，培养基里很多黑色的东西.jpg


HeLa细胞状态-1
这几张是刚换完液之后照的，细胞里有很多空泡.jpg


HeLa细胞状态-2
这几张是刚换完液之后照的.jpg


HeLa细胞状态-3
这几张是刚换完液之后照的.jpg


HeLa细胞状态-4
这几张是刚换完液之后照的.jpg
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加油！
1楼 2014-02-27 20:51:50
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旧西圆

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果培养基长势良好，没什么浑浊的话，会不会是黑胶虫污染？
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2楼2014-02-27 21:25:19
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水晶之恋丹

金虫 (小有名气)

LD
引用回帖:
2楼: Originally posted by 旧西圆 at 2014-02-27 21:25:19
如果培养基长势良好，没什么浑浊的话，会不会是黑胶虫污染？

细胞长势很好，长得也很快，后面这四张照片是昨天传代的，今天就长得这么多，培养基也不浑浊，是澄清的，黑胶虫污染的话有哪些表现呢？要怎么处理呢？谢谢！
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加油！
3楼2014-02-27 22:00:48
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旧西圆

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 水晶之恋丹 at 2014-02-27 22:00:48
细胞长势很好，长得也很快，后面这四张照片是昨天传代的，今天就长得这么多，培养基也不浑浊，是澄清的，黑胶虫污染的话有哪些表现呢？要怎么处理呢？谢谢！...

可以取一点出来试着加抗生素监测下，抗生素对黑胶虫是没用的。不过看你后面几张照片也不是很明显，注意勤换液吧。如果严重了就不好处理了，只能重新灭菌重做，主要是平时注意实验环境。
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4楼2014-02-27 22:50:09
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22-0.45 μm）的原核生物，在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明：当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
一般是用抗生素杀灭或者专用支原体清除试剂或者支原体预防试剂。
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5楼2014-02-28 10:04:56
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黄颖

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
支原体污染一般是看不见的，你可以用DAPI染色的方法确定是不是支原体污染，细胞出现空泡是因为状态不好，建议不要养太满，及时传代，穿几代后就会消失。
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6楼2014-02-28 10:57:15
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