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海角的颜色

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求解:HPLC测定生物碱类物质,为啥拖尾一直很严重? 已有6人参与

我按照药典方法,根据文献,及出峰时间略调整一下梯度条件及比例,但一直拖尾很严重。做了有3个月,最近在酸水里加了0.8mL/1000mL的三乙胺,仍然一直对称因子没有超过0.8的。
流动相A:乙腈-四氢呋喃(5:3)  流动相B:0.1mol/L醋酸铵加0.5mol/L冰醋酸。

我是同时测定多个生物碱,试过某文献上换成乙腈和水梯度做流动相,但完全分不开,现在不敢乱换流动相了。。。
时间紧迫,HPLC方法学都还没建立,我真是着急上火呀。。。

据说四氢呋喃也有扫尾作用,我加大了四氢呋喃比例,并且加入三乙胺,对称因子仍然只有0.7几,虽然柱子不是新的但是塔板数有1,2万,好像不是柱子的问题。
这到底是为何?求大神帮帮忙 %>_<%
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靠谱女青年
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ranyin88

银虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
你确定你用的柱子没问题吗
业精于勤荒于嬉!!!
2楼2014-02-13 14:09:37
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
使用阳离子复合色谱柱,马上解决问题
3楼2014-02-13 14:54:58
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有点不明白你测碱用的是酸性的流动相? 如果不能换柱子的话 流动相B可以换成0.5%的氨水溶液 流动相A:乙腈-甲醇(2:1) 加入甲醇是为了减小洗脱 看分离会不会好点 如果可以换柱子的话 以下几款可以考虑下 首选HILIC柱子 几个公司吹得这个柱子做生物碱很好 ;agilent的Extend C18 这个也是一款耐碱的柱子;另外 液相的柱子塔板拖尾的情况下有1万多 这个貌似有点不对哟
4楼2014-02-13 15:04:16
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416158716

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
拖尾现象的原因多种,教科书都有很多解决办法,但是有时候很多新手也会忽略,选择合适的柱子,然后考察柱子是不是对待测物质可以,我也曾经遇到过情况,原本不拖尾的东西,隔间一个月后再用同样的条件和柱子测定,部分物质出现拖尾,部分物质又不影响,很大可能是柱子老化了,尝试换换新的柱子试试。
埋头苦干,徒劳无功,心理智清,成就大事
5楼2014-02-15 15:19:42
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1528009020

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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加千分之五的三乙氨试试

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-02-15 15:49:47
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

做生物碱的话先看看分子量有多大,要是大的话可以选择C8,C4柱,而且柱子要是全封尾的,不然加弱碱类物质肯定还是拖尾的
悲催的研发!
7楼2014-02-18 09:36:00
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