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海角的颜色

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求解:HPLC测定生物碱类物质,为啥拖尾一直很严重? 已有6人参与

我按照药典方法,根据文献,及出峰时间略调整一下梯度条件及比例,但一直拖尾很严重。做了有3个月,最近在酸水里加了0.8mL/1000mL的三乙胺,仍然一直对称因子没有超过0.8的。
流动相A:乙腈-四氢呋喃(5:3)  流动相B:0.1mol/L醋酸铵加0.5mol/L冰醋酸。

我是同时测定多个生物碱,试过某文献上换成乙腈和水梯度做流动相,但完全分不开,现在不敢乱换流动相了。。。
时间紧迫,HPLC方法学都还没建立,我真是着急上火呀。。。

据说四氢呋喃也有扫尾作用,我加大了四氢呋喃比例,并且加入三乙胺,对称因子仍然只有0.7几,虽然柱子不是新的但是塔板数有1,2万,好像不是柱子的问题。
这到底是为何?求大神帮帮忙 %>_<%
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靠谱女青年
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

做生物碱的话先看看分子量有多大,要是大的话可以选择C8,C4柱,而且柱子要是全封尾的,不然加弱碱类物质肯定还是拖尾的
悲催的研发!
7楼2014-02-18 09:36:00
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