24小时热门版块排行榜    

查看: 1822  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

[求助] 疏水柱纯化多肽 已有3人参与

化学合成的1.7K的17肽(PI=4.54),样品溶于20mM PB, PH8.0,含1MNaCL(样品中只含裸肽),用以下条件洗脱,
柱子为Hitrip Phenyl (high sub) 1mL
A:20mM PB, PH8.0
B:20mM PB, 1M NaCL, PH8.0
100%B,10min; 100%B→100%A,15min。0.8mL/min
上样后1min就出现一穿透峰,梯度洗脱时未见峰出现。
这种情况说明裸肽未挂柱,请问有什么改进方法使裸肽挂柱?谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-07 16:47:15
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试

组里面以前有人做过蛋白的HIC纯化,据他的经验,氯化钠和硫酸铵的作用都差不多的。
4楼2014-01-08 10:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, 有帮助, 尝试过调Buffer PH到5.5,盐提高到2M,结果差不多。 2014-01-08 10:56:55
调整PH值 或者加大B的盐浓度。靠疏水作用,纯化多肽 可以用反向层析树脂或者反向C18,效果应该更好吧
2楼2014-01-07 15:02:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, 有帮助 2014-01-08 10:58:02
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试
3楼2014-01-07 16:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5 2014-01-08 15:14:08
确实1700的小肽没必要用HIC,用C18制备柱就可以,事实上大部分多肽厂家也是这么做的。
5楼2014-01-08 13:16:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 材料学调剂 +6 提神豆沙包 2026-02-28 8/400 2026-03-01 10:53 by sunny81
[考研] 材料化工调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-01 10:46 by ms629
[考研] 291分工科求调剂 +7 science饿饿 2026-03-01 8/400 2026-03-01 10:43 by sunny81
[考研] 0856化工专硕求调剂 +5 董boxing 2026-03-01 5/250 2026-03-01 10:41 by sunny81
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见