应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 疏水柱纯化多肽
81/1返回列表
查看: 1848  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

[求助] 疏水柱纯化多肽 已有3人参与

化学合成的1.7K的17肽（PI=4.54），样品溶于20mM PB, PH8.0，含1MNaCL（样品中只含裸肽），用以下条件洗脱，
柱子为Hitrip Phenyl (high sub) 1mL
A：20mM PB, PH8.0
B：20mM PB, 1M NaCL, PH8.0
100%B,10min; 100%B→100%A,15min。0.8mL/min
上样后1min就出现一穿透峰，梯度洗脱时未见峰出现。
这种情况说明裸肽未挂柱，请问有什么改进方法使裸肽挂柱？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-06 11:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, ★有帮助, 尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多。 2014-01-08 10:56:55
调整PH值 或者加大B的盐浓度。靠疏水作用，纯化多肽 可以用反向层析树脂或者反向C18，效果应该更好吧
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-07 15:02:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, ★有帮助 2014-01-08 10:58:02
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-07 16:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-07 16:47:15
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试

组里面以前有人做过蛋白的HIC纯化，据他的经验，氯化钠和硫酸铵的作用都差不多的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-08 10:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5 2014-01-08 15:14:08
确实1700的小肽没必要用HIC，用C18制备柱就可以，事实上大部分多肽厂家也是这么做的。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-08 13:16:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)
如果你为了发文章或是其他目的可以试试，从原理上来说，你pH太高了，都带负电了，亲水作用就强了而不是疏水作用，在等电点附近试试，只要能溶解
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-08 13:21:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qiujm at 2014-01-08 13:16:20
确实1700的小肽没必要用HIC，用C18制备柱就可以，事实上大部分多肽厂家也是这么做的。

尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-08 15:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yaiqi-87 at 2014-01-08 15:14:46
尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多...

那就不适合用HIC，选择其他类型的填料好了
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-08 15:46:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yaiqi-87 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +4 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 4/200 2026-03-24 07:32 by wangy0907
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭