应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 疏水柱纯化多肽
81/1返回列表
查看: 1825  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

[求助] 疏水柱纯化多肽 已有3人参与

化学合成的1.7K的17肽（PI=4.54），样品溶于20mM PB, PH8.0，含1MNaCL（样品中只含裸肽），用以下条件洗脱，
柱子为Hitrip Phenyl (high sub) 1mL
A：20mM PB, PH8.0
B：20mM PB, 1M NaCL, PH8.0
100%B,10min; 100%B→100%A,15min。0.8mL/min
上样后1min就出现一穿透峰，梯度洗脱时未见峰出现。
这种情况说明裸肽未挂柱，请问有什么改进方法使裸肽挂柱？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-06 11:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, ★有帮助, 尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多。 2014-01-08 10:56:55
调整PH值 或者加大B的盐浓度。靠疏水作用，纯化多肽 可以用反向层析树脂或者反向C18，效果应该更好吧
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-07 15:02:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5, ★有帮助 2014-01-08 10:58:02
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-07 16:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-01-07 16:47:15
可以尝试将样品离子提供盐换成硫酸铵。用1M的硫酸铵试试

组里面以前有人做过蛋白的HIC纯化，据他的经验，氯化钠和硫酸铵的作用都差不多的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-08 10:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaiqi-87: 金币+5 2014-01-08 15:14:08
确实1700的小肽没必要用HIC，用C18制备柱就可以，事实上大部分多肽厂家也是这么做的。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-08 13:16:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)
如果你为了发文章或是其他目的可以试试，从原理上来说，你pH太高了，都带负电了，亲水作用就强了而不是疏水作用，在等电点附近试试，只要能溶解
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-08 13:21:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qiujm at 2014-01-08 13:16:20
确实1700的小肽没必要用HIC，用C18制备柱就可以，事实上大部分多肽厂家也是这么做的。

尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-08 15:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiujm

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yaiqi-87 at 2014-01-08 15:14:46
尝试过调Buffer PH到5.5，盐提高到2M，结果差不多...

那就不适合用HIC，选择其他类型的填料好了
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-08 15:46:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yaiqi-87 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂； 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭