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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 工艺技术 » 膜技术 » 如何测试牛血清蛋白的截留率
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信步~闲庭

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何测试牛血清蛋白的截留率 已有4人参与

求助各位在用紫外测试BSA截留率时 ，是将BSA溶解在PBS缓冲液中还是去离子水中的？ 另外，溶解在PBS时，用什么溶剂做空白？我之前用空气做空白 感觉测试值很不稳定 当BSA浓度低于0.1g/L时，吸收值为负值。
测试时BSA溶液需要现配现用么？我之前是配置后放4℃冰箱下放置一个星期后测试的，截留率都很低 而且还出现了过滤后的吸光度高于原液，找不到原因啊！！

谢谢各位了 课题组第一个做膜的 什么都不懂，又没个商量指导的人 谢谢各位了
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1楼 2014-01-03 16:09:09
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周海山

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
scu2020: 金币+1, 感谢应助交流，常来工艺技术版 2014-02-26 23:10:56
用紫外测试BSA截留率时，BSA溶液提前一天配，主要是因为在配制的过程中会起泡沫，静置一夜，第二天补加去离子水至标定线。我用紫外拟合下来，R2=0.9998 ，具有很好拟合性。
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2楼2014-01-08 10:59:16
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wuyangucas88

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 周海山 at 2014-01-08 10:59:16
用紫外测试BSA截留率时，BSA溶液提前一天配，主要是因为在配制的过程中会起泡沫，静置一夜，第二天补加去离子水至标定线。我用紫外拟合下来，R2=0.9998 ，具有很好拟合性。

楼主你直接测试的BSA的浓度吗？没有加入其它试剂络合？在多长波长处测试的？
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3楼2014-02-26 10:36:00
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绿洲王云

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
信步~闲庭(scu2020代发): 金币+1, 感谢应助交流，常来工艺技术版 2014-02-26 23:11:06
粗略的测试的话，可以用测电导率，比较截留前后液的电导
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4楼2014-02-26 10:59:14
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周海山

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wuyangucas88 at 2014-02-26 10:36:00
楼主你直接测试的BSA的浓度吗？没有加入其它试剂络合？在多长波长处测试的？...

没有
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5楼2014-02-26 16:09:58
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于振江

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
信步~闲庭(scu2020代发): 金币+1, 感谢应助交流，常来工艺技术版 2014-03-02 22:34:46
将BSA溶解到pH=7.4的PBS缓冲溶液中，真空消泡，最好现配现用，因为BSA容易团聚在一起，影响实验结果。空白样就用PBS矫正就行。直接测试，就可以了，BSA不需要加络合剂。此外，你做实验的时候可以先做一个光谱测量，看你在280nm附近有无吸收峰。
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与人交谈一次，往往比多年闭门劳作更能启发心智。思想必定是在与人交往中产生，而在孤独中进行加工和表达。——列夫·托尔斯泰
6楼2014-03-02 10:27:10
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小豆包0721

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

配置500ppm的BSA原液，讲测试前后的两个原液10ml左右取出，作为测试样本，紫外测试280nm，记录下前后的吸光度，用1-截留液/原液 计算出对BSA的截留率，至于空白，你在连机后，两个比色皿中都放入去离子水就可以，之后测试就把其中一个换成BSA液，剩下的一个不动，你试试吧~很简单的也很快。我也是做超滤膜的~~互相帮助哈！
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强迫症科研小伙子
7楼2014-09-23 10:47:18
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小豆包0721

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小豆包0721 at 2014-09-23 10:47:18
配置500ppm的BSA原液，讲测试前后的两个原液10ml左右取出，作为测试样本，紫外测试280nm，记录下前后的吸光度，用1-截留液/原液 计算出对BSA的截留率，至于空白，你在连机后，两个比色皿中都放入去离子水就可以，之 ...

因为最后结果是比值。所以开始的500ppm也不用很精准。
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强迫症科研小伙子
8楼2014-09-23 10:48:32
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