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信步~闲庭

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何测试牛血清蛋白的截留率 已有4人参与

求助各位在用紫外测试BSA截留率时 ,是将BSA溶解在PBS缓冲液中还是去离子水中的? 另外,溶解在PBS时,用什么溶剂做空白?我之前用空气做空白 感觉测试值很不稳定 当BSA浓度低于0.1g/L时,吸收值为负值。
测试时BSA溶液需要现配现用么?我之前是配置后放4℃冰箱下放置一个星期后测试的,截留率都很低 而且还出现了过滤后的吸光度高于原液,找不到原因啊!!

谢谢各位了 课题组第一个做膜的 什么都不懂,又没个商量指导的人 谢谢各位了
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于振江

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


信步~闲庭(scu2020代发): 金币+1, 感谢应助交流,常来工艺技术版 2014-03-02 22:34:46
将BSA溶解到pH=7.4的PBS缓冲溶液中,真空消泡,最好现配现用,因为BSA容易团聚在一起,影响实验结果。空白样就用PBS矫正就行。直接测试,就可以了,BSA不需要加络合剂。此外,你做实验的时候可以先做一个光谱测量,看你在280nm附近有无吸收峰。
与人交谈一次,往往比多年闭门劳作更能启发心智。思想必定是在与人交往中产生,而在孤独中进行加工和表达。——列夫·托尔斯泰
6楼2014-03-02 10:27:10
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周海山

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


scu2020: 金币+1, 感谢应助交流,常来工艺技术版 2014-02-26 23:10:56
用紫外测试BSA截留率时,BSA溶液提前一天配,主要是因为在配制的过程中会起泡沫,静置一夜,第二天补加去离子水至标定线。我用紫外拟合下来,R2=0.9998 ,具有很好拟合性。
2楼2014-01-08 10:59:16
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wuyangucas88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 周海山 at 2014-01-08 10:59:16
用紫外测试BSA截留率时,BSA溶液提前一天配,主要是因为在配制的过程中会起泡沫,静置一夜,第二天补加去离子水至标定线。我用紫外拟合下来,R2=0.9998 ,具有很好拟合性。

楼主你直接测试的BSA的浓度吗?没有加入其它试剂络合?在多长波长处测试的?
3楼2014-02-26 10:36:00
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绿洲王云

新虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


信步~闲庭(scu2020代发): 金币+1, 感谢应助交流,常来工艺技术版 2014-02-26 23:11:06
粗略的测试的话,可以用测电导率,比较截留前后液的电导
4楼2014-02-26 10:59:14
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