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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 求助：柱层析结果
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luvfane

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助：柱层析结果 已有3人参与

上硅胶柱跑了十几个梯度，不过很多梯度接下来的东西点薄层色谱结果很相似，跟粗品也相似。
请问大家我这个薄层是要换展开剂重新点吗？还是由于柱子本身分离效果的原因那些组分没有分开？如果要防止拖尾还应该怎么做呢？我目前的目的是把薄层结果相同的组分合并起来，富集后进行下一步操作。

PS：跑硅胶柱用的甲醇是无水甲醇，还是分析纯大于99.5%的甲醇就可以呢？还是都无所谓？
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1楼 2013-12-31 20:15:53
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xiaomo3511

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-01-04 17:00:48
引用回帖:
2楼: Originally posted by luvfane at 2013-12-31 20:17:03
补充一下，我用硅胶柱跑脑苷脂粗品的水解产物，上样量0.5g，梯度从石油醚：乙酸乙酯，到乙酸乙酯：甲醇，再到纯甲醇，一共跑了十多个梯度。

可是自从乙酸乙酯：甲醇的梯度接下来的组分开始，用薄层色谱的结果都很 ...

你的梯度选择有点问题，我们一般选择洗脱剂的时候是根据RF值选择的，据老师说最好在0.2左右。
     你的洗脱剂选择应该是氯：甲=30：1--10：1。可能是这样的，具体不确定。
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3楼2014-01-02 20:46:06
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luvfane

金虫 (初入文坛)
补充一下，我用硅胶柱跑脑苷脂粗品的水解产物，上样量0.5g，梯度从石油醚：乙酸乙酯，到乙酸乙酯：甲醇，再到纯甲醇，一共跑了十多个梯度。

可是自从乙酸乙酯：甲醇的梯度接下来的组分开始，用薄层色谱的结果都很相似，与上柱子之前的粗品比较也很相似。

展开剂比例为  氯仿：甲醇：水  65:25:4，有拖尾，由于物质有些碱性，我又加了一滴氨水防拖尾。

可跑出来的结果还是不理想。

又拖尾，然后很多瓶的薄层结果都相似。

这个情况到底应该怎么办啊?
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2楼2013-12-31 20:17:03
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luvfane

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaomo3511 at 2014-01-02 20:46:06
你的梯度选择有点问题，我们一般选择洗脱剂的时候是根据RF值选择的，据老师说最好在0.2左右。
     你的洗脱剂选择应该是氯：甲=30：1--10：1。可能是这样的，具体不确定。...

氯仿甲醇洗脱的确应该作为第一选择，不过最初由于氯仿毒性比较大，就避开了这个体系。
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4楼2014-01-03 19:52:48
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jwt345532945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-01-04 17:00:55
洗脱的梯度跨越太小啊，应该换下洗脱条件
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5楼2014-01-03 20:03:44
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