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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 要做硅胶柱层析，提取出的浸膏怎么与空白硅胶拌样啊。。。新手求助
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楠McFly

新虫 (小有名气)

[求助] 要做硅胶柱层析，提取出的浸膏怎么与空白硅胶拌样啊。。。新手求助

是直接拌在一起，再加入有机溶剂充分溶解、挥发吗？
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1楼2013-07-04 16:15:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ice无名

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
楠McFly: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-04 17:19:17
引用回帖:
5楼: Originally posted by 楠McFly at 2013-07-04 17:10:53
我后面是做梯度洗脱，氯仿：甲醇系统，极性由小到大，浸膏是乙酸乙酯部分回流得到的，您感觉选哪种溶解浸膏比较好啊，谢谢啊，之前不是学这个的，头疼啊。。。...

应该是极性的大的甲醇溶解，加的不要太多，刚好溶了就好，加硅胶的量就自己看看文献，具体忘了，边挥干边搅拌，成沙状即可
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前进不必遗憾，若是美好叫做精彩，若是糟糕叫做经历
6楼2013-07-04 17:14:56
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ice无名

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-07-04 17:29:58
加入你要跑柱的一个极性相近的溶剂，溶解后加入硅胶，可用水浴挥干等方法
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前进不必遗憾，若是美好叫做精彩，若是糟糕叫做经历
2楼2013-07-04 16:19:19
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Decis

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
中药2000: 金币+2, 谢谢 2013-07-04 17:30:04
先用有机溶剂将浸膏溶解，然后将空白硅胶加入到溶液中，再挥发掉溶剂。
在挥发过程中注意搅拌，保证拌样均匀。
另，浸膏一般不太好溶，可适当加热，或轮用不同极性的溶剂进行溶解。
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小木虫，威力无穷
3楼2013-07-04 16:20:03
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楠McFly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Decis at 2013-07-04 16:20:03
先用有机溶剂将浸膏溶解，然后将空白硅胶加入到溶液中，再挥发掉溶剂。
在挥发过程中注意搅拌，保证拌样均匀。
另，浸膏一般不太好溶，可适当加热，或轮用不同极性的溶剂进行溶解。

溶解用的这种有机溶剂如何选择呢？浸膏是乙酸乙酯部分回流得到的，是不是要再用乙酸乙酯啊，上柱子以后要梯度洗脱，氯仿：甲醇系统，谢谢啊，专业不是学药植方面的，所以不太懂啊
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4楼2013-07-04 17:08:45
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楠McFly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ice无名 at 2013-07-04 16:19:19
加入你要跑柱的一个极性相近的溶剂，溶解后加入硅胶，可用水浴挥干等方法

我后面是做梯度洗脱，氯仿：甲醇系统，极性由小到大，浸膏是乙酸乙酯部分回流得到的，您感觉选哪种溶解浸膏比较好啊，谢谢啊，之前不是学这个的，头疼啊。。。
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5楼2013-07-04 17:10:53
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楠McFly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ice无名 at 2013-07-04 17:14:56
应该是极性的大的甲醇溶解，加的不要太多，刚好溶了就好，加硅胶的量就自己看看文献，具体忘了，边挥干边搅拌，成沙状即可...

谢谢谢谢
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7楼2013-07-04 17:19:07
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whg0408

银虫 (初入文坛)
如果你的浸膏较量少（如500g以下）你可以用氯仿/甲醇（先加氯仿在加热的条件下溶解，如果有部分不溶再加甲醇）的混合溶剂充分溶解（充分溶解是指你的样品没有大颗粒状或粘在一起）注：溶解的溶剂不要太多，刚好就行，不然拌样会浪费很多时间
浸膏过大柱只是起到分段的作用，所以梯度洗脱的时候不用分很细，过氯仿/甲醇柱时记得测旋出来的溶剂密度（甲醇容易挂柱，密度会有所偏差），换算成你的洗脱剂密度
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8楼2013-07-04 23:10:49
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wanglibo66

金虫 (小有名气)
一般拌样硅胶是你样品的倍数是2.5-3倍，样品比较黏的话可以用3倍，溶解浸膏的溶剂是什么都行，只有是有机溶剂就可以，因为你上柱前拌样硅胶一定是干燥的状态，溶剂都挥没了。另外需要注意的是，用尽量少的溶剂溶解你的浸膏，然后用滴管慢慢往拌样硅胶里面加样品，每次不要加太多，每次拌均匀、挥干溶剂之后再下一次滴加样品溶液，直到伴完。
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9楼2013-07-05 07:49:19
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耿骥

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 楠McFly at 2013-07-04 17:10:53
我后面是做梯度洗脱，氯仿：甲醇系统，极性由小到大，浸膏是乙酸乙酯部分回流得到的，您感觉选哪种溶解浸膏比较好啊，谢谢啊，之前不是学这个的，头疼啊。。。...

无所谓那种溶剂溶解的，只要溶解就可以了，到最后反正是要挥发除尽的。
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10楼2013-07-06 17:09:51
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