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sgn311

铜虫 (小有名气)

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[求助] 柱层析之分步洗脱，求助

最近在用柱层析做油脂的分离，根据极性的不同，主要把油分为中性脂、极性脂。大多数文献上说的都是氯仿洗脱中性脂、甲醇洗脱极性脂。教科书中提到要用柱体积的十倍甚至四十倍去分步洗脱，因刚接触这方面实验，想问问如果先用极性小的试剂洗脱那么大倍数的话，结合在硅胶柱上的极性脂部分会不会也有部分会被淋洗下来。柱体积是不是就是柱子中所装的硅胶柱的体积，谢谢大家

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1楼2011-11-02 15:12:42

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qiuseyiran

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

要注意流速，要一滴一滴流下，流速太快会把其他成分冲下来

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2楼2011-11-02 18:54:03

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645329775

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 鼓励新人奖 2011-11-02 20:20:17

流速的快慢将影响理论塔板高度，从而影响分辨率。事实上，速度太快，各组分在固液两相中平衡时间短，相互分不开，仍以混合组分流出。速度太慢，将增大物质的扩散，同样达不到理想的分离效果。只有多次试验才会得到合适的流速。总之，必须经过反复的试验与调整（可以用正交试验或优选法），才能得到最佳的洗脱条件。还应强调的一点是，在整个洗脱过程中，千万不能干柱，否则分离纯化将会前功尽弃。

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3楼2011-11-02 19:40:39

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