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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 柱层析之分步洗脱，求助
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sgn311

铜虫 (小有名气)

[求助] 柱层析之分步洗脱，求助

最近在用柱层析做油脂的分离，根据极性的不同，主要把油分为中性脂、极性脂。大多数文献上说的都是氯仿洗脱中性脂、甲醇洗脱极性脂。教科书中提到要用柱体积的十倍甚至四十倍去分步洗脱，因刚接触这方面实验，想问问如果先用极性小的试剂洗脱那么大倍数的话，结合在硅胶柱上的极性脂部分会不会也有部分会被淋洗下来。柱体积是不是就是柱子中所装的硅胶柱的体积，谢谢大家
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1楼 2011-11-02 15:12:42
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qiuseyiran

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要注意流速，要一滴一滴流下，流速太快会把其他成分冲下来
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2楼2011-11-02 18:54:03
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645329775

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 鼓励新人奖 2011-11-02 20:20:17
流速的快慢将影响理论塔板高度，从而影响分辨率。事实上，速度太快，各组分在固液两相中平衡时间短，相互分不开，仍以混合组分流出。速度太慢，将增大物质的扩散，同样达不到理想的分离效果。只有多次试验才会得到合适的流速。总之，必须经过反复的试验与调整（可以用正交试验或优选法），才能得到最佳的洗脱条件。还应强调的一点是，在整个洗脱过程中，千万不能干柱，否则分离纯化将会前功尽弃。
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3楼2011-11-02 19:40:39
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jackp_sdau

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小极性容积大体积洗脱应该没有问题的，但是要注意身体奥，氯仿可不好玩儿。
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4楼2011-11-03 09:04:44
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

柱体积就是柱子中所装的硅胶的体积
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5楼2011-11-03 10:51:03
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sciencechn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

想问问如果先用极性小的试剂洗脱那么大倍数的话，结合在硅胶柱上的极性脂部分会不会也有部分会被淋洗下来。
楼主的这个想法，可以试一下，但是洗脱量大带来的干扰也会变多。
3楼已经讲得很明白了。
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6楼2011-11-03 12:54:48
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

一般都是硅胶装进柱子的高度计算，要注意淋洗液的用量
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奋斗是金！
7楼2011-11-03 13:04:17
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毛毛虫2618

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

流速不要太快，具体用量要根据洗出液的检测结果来决定啊，这个不是固定的
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只要用心就能赢得精彩
8楼2011-11-04 11:34:21
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qwz

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

嗯，还要注意一点，选好柱子，进样分布一定要好，控制好进样的浓度，总体积，装柱注意垂直度，好好做好分析数据，根据结果调整，控制好分离度是第一位的，基本工作完成后在做回收率，极性的分离一定锁定温度，不同温度结果不一样。
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9楼2011-11-06 11:02:29
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sukungenga

木虫 (小有名气)

分析工程师

【答案】应助回帖

应选择长柱子，低流速的流量，这样塔板理论高，易分离，原因是：流速的快慢将影响理论塔板高度，从而影响分辨率。事实上，速度太快，各组分在固液两相中平衡时间短，相互分不开，仍以混合组分流出。速度太慢，将增大物质的扩散，同样达不到理想的分离效果。只有多次试验才会得到合适的流速。
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10楼2011-11-06 18:44:38
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