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铜虫 (小有名气)

[求助] 柱层析之分步洗脱,求助

最近在用柱层析做油脂的分离,根据极性的不同,主要把油分为中性脂、极性脂。大多数文献上说的都是氯仿洗脱中性脂、甲醇洗脱极性脂。教科书中提到要用柱体积的十倍甚至四十倍去分步洗脱,因刚接触这方面实验,想问问如果先用极性小的试剂洗脱那么大倍数的话,结合在硅胶柱上的极性脂部分会不会也有部分会被淋洗下来。柱体积是不是就是柱子中所装的硅胶柱的体积,谢谢大家
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qwz

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

嗯,还要注意一点,选好柱子,进样分布一定要好,控制好进样的浓度,总体积,装柱注意垂直度,好好做好分析数据,根据结果调整,控制好分离度是第一位的,基本工作完成后在做回收率,极性的分离一定锁定温度,不同温度结果不一样。
9楼2011-11-06 11:02:29
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qiuseyiran

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要注意流速,要一滴一滴流下,流速太快会把其他成分冲下来
2楼2011-11-02 18:54:03
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645329775

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 鼓励新人奖 2011-11-02 20:20:17
流速的快慢将影响理论塔板高度,从而影响分辨率。事实上,速度太快,各组分在固液两相中平衡时间短,相互分不开,仍以混合组分流出。速度太慢,将增大物质的扩散,同样达不到理想的分离效果。只有多次试验才会得到合适的流速。总之,必须经过反复的试验与调整(可以用正交试验或优选法),才能得到最佳的洗脱条件。还应强调的一点是,在整个洗脱过程中,千万不能干柱,否则分离纯化将会前功尽弃。
3楼2011-11-02 19:40:39
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jackp_sdau

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小极性容积大体积洗脱应该没有问题的,但是要注意身体奥,氯仿可不好玩儿。
4楼2011-11-03 09:04:44
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