24小时热门版块排行榜    

查看: 878  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

s6120610021

铜虫 (小有名气)

[求助] 纤维素酶活求解惑 已有1人参与

我在国药集团买的纤维素酶,上面写的酶活大于等于15000U/g
我算了一下那1mg应该大于等于15u,我用16.9g纤维素酶配制5ml溶液,那按照我稀释的浓度1ml里面应该有3mg多酶计算的酶活应该是30-40,但是我按照下面方法计算出的酶活为3.388U/ml
请各位帮忙解惑,谢谢大家!
方法:我用16.9g纤维素酶配制5ml溶液,之后取0.5ml加1.5ml柠檬酸缓冲溶液,1*6cm滤纸,50℃下60min,之后加3mlDNS,煮沸5min,之后取200微升,加2.5ml去离子水,测吸光度0.212,将吸光度带入我测得葡萄糖公式得葡萄糖0.01255mg/ml,之后带入酶活公式X=A*l/0.5*n得3.388U/ml,总感觉测得酶活过低,我是这样算的0.01255*2*135       135是稀释倍数,我是这样算的,一开始0.5ml酶液加1.5缓冲液最后加3mlDNS相当稀释10倍,之后取200微升加2.5ml水相当稀释13.5倍,最后得总稀释135倍
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
s6120610021: 金币+10, ★★★很有帮助, 16.9mg写错了 2013-12-20 09:10:09
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-12-20 22:07:51
买来的纤维素酶标注的酶活并不一定是以滤纸为底物测得,你用1%的羧甲基纤维素钠做底物再测一次酶活试试~~。
还有就是你用5ml去溶解16.9g的酶,这能溶解吗~,我感觉溶解将近20g的酶,至少也得100ml吧。。。,还有煮沸那一步,你再多煮5分钟试试。
大家相互帮助哈
5楼2013-12-20 00:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
信息提示
请填处理意见