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s6120610021

铜虫 (小有名气)

[求助] 纤维素酶活求解惑 已有1人参与

我在国药集团买的纤维素酶,上面写的酶活大于等于15000U/g
我算了一下那1mg应该大于等于15u,我用16.9g纤维素酶配制5ml溶液,那按照我稀释的浓度1ml里面应该有3mg多酶计算的酶活应该是30-40,但是我按照下面方法计算出的酶活为3.388U/ml
请各位帮忙解惑,谢谢大家!
方法:我用16.9g纤维素酶配制5ml溶液,之后取0.5ml加1.5ml柠檬酸缓冲溶液,1*6cm滤纸,50℃下60min,之后加3mlDNS,煮沸5min,之后取200微升,加2.5ml去离子水,测吸光度0.212,将吸光度带入我测得葡萄糖公式得葡萄糖0.01255mg/ml,之后带入酶活公式X=A*l/0.5*n得3.388U/ml,总感觉测得酶活过低,我是这样算的0.01255*2*135       135是稀释倍数,我是这样算的,一开始0.5ml酶液加1.5缓冲液最后加3mlDNS相当稀释10倍,之后取200微升加2.5ml水相当稀释13.5倍,最后得总稀释135倍
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s6120610021

铜虫 (小有名气)

自己顶一下
2楼2013-12-18 15:08:11
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帮顶一下
3楼2013-12-19 09:23:04
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s6120610021

铜虫 (小有名气)

4楼2013-12-19 21:48:48
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
s6120610021: 金币+10, ★★★很有帮助, 16.9mg写错了 2013-12-20 09:10:09
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-12-20 22:07:51
买来的纤维素酶标注的酶活并不一定是以滤纸为底物测得,你用1%的羧甲基纤维素钠做底物再测一次酶活试试~~。
还有就是你用5ml去溶解16.9g的酶,这能溶解吗~,我感觉溶解将近20g的酶,至少也得100ml吧。。。,还有煮沸那一步,你再多煮5分钟试试。
大家相互帮助哈
5楼2013-12-20 00:11:24
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