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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教反向HPLC分离纯化的问题，附图
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edmundcui

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教反向HPLC分离纯化的问题，附图 已有2人参与

流动相是甲醇-水，5%-100%梯度洗脱，中间有几个峰挨得比较近，如何增大他们的基线分离呢？
请教反向HPLC分离纯化的问题，附图
A-EA.jpg
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1楼 2013-12-11 15:27:24
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10min前梯度再快一点，10min后梯度放慢看看
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悲催的研发！
2楼2013-12-12 08:50:46
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edmundcui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-12-12 08:50:46
10min前梯度再快一点，10min后梯度放慢看看

谢谢，我预实验梯度前十分钟一直是5%，10-40min,5%-100%;40-50min,100%甲醇，50-60min,100%-5%,前十分钟如何加大梯度？从5%增大到比较密集的那几个峰的甲醇浓度吗？
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3楼2013-12-13 15:29:31
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
十分钟一直是5%，10-40min,5%-70%;40-50min,70-100%甲醇，50-60min,100%-5%,这个试试
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4楼2013-12-13 17:10:00
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edmundcui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-12-13 17:10:00
十分钟一直是5%，10-40min,5%-70%;40-50min,70-100%甲醇，50-60min,100%-5%,这个试试

谢谢，试过了，前十五分钟还是没峰，不过30min那个峰跟前后的有基线分开，40-50min有多出几个小峰，是不是流速也要加大啊？我目前用的一直是3ml/min,另外如果我对每个峰检测活性，找到活性组分峰，重复过制备柱，你觉得有用吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-12-14 01:22:57
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