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王文静341

新虫 (初入文坛)

[求助] 生物碱色谱峰拖尾的问题 已有1人参与

求助:HPLC所测成分是pka值11左右的生物碱,流动相采用乙腈-磷酸二氢钾(磷酸调pH3),但是拖尾因子达到2了,怎么改善?加三乙胺多少呢?请路过的高手指点一下,跪谢!
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JinyHuang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
王文静341: 金币+1 2013-12-12 11:16:21
你用什么色谱柱?换跟耐碱的柱子例如cromasil的柱子,液相分析的时候既要考虑流动相又要考虑固定相,加三乙胺不宜过多,你先加1-2ml试试

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-12-08 07:59:26
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笑多会怀孕

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by JinyHuang at 2013-12-08 07:59:26
你用什么色谱柱?换跟耐碱的柱子例如cromasil的柱子,液相分析的时候既要考虑流动相又要考虑固定相,加三乙胺不宜过多,你先加1-2ml试试

最好选择专门分生物碱的柱子
3楼2013-12-08 08:31:52
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
王文静341: 金币+1 2013-12-12 11:09:58
楼主,根据反相离子抑制技术,pKa值为11的生物碱,你用磷酸盐(磷酸调节pH=3),生物碱已经解离了,它的响应时间变长,峰型就自然拖尾了。应该用三乙胺调节pH为11±2,至于加多少,楼主您慢慢试一下,祝你实验顺利。
4楼2013-12-10 10:40:52
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王文静341: 金币+2 2013-12-12 11:09:50
至少PH也得8,你的3 明显不合适啊  加减千分之一是没问题的
Domyallbesttohaveahappylife.
5楼2013-12-10 11:03:49
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王文静341

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-12-10 11:03:49
至少PH也得8,你的3 明显不合适啊  加减千分之一是没问题的

因为我同时测两种成分,另外一种是pKa5,所以用3,希望给详解
潜心学习
6楼2013-12-12 11:09:41
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王文静341

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-12-10 10:40:52
楼主,根据反相离子抑制技术,pKa值为11的生物碱,你用磷酸盐(磷酸调节pH=3),生物碱已经解离了,它的响应时间变长,峰型就自然拖尾了。应该用三乙胺调节pH为11±2,至于加多少,楼主您慢慢试一下,祝你实验顺利 ...

可是我还要考虑到另一个成分,pKa是5的酸成分,唉唉,希望再次给予指点
潜心学习
7楼2013-12-12 11:12:32
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王文静341

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-12-10 11:03:49
至少PH也得8,你的3 明显不合适啊  加减千分之一是没问题的

但是我同时要考虑另一个pKa5的酸性成分,望详解
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8楼2013-12-12 11:13:28
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王文静341

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by JinyHuang at 2013-12-08 07:59:26
你用什么色谱柱?换跟耐碱的柱子例如cromasil的柱子,液相分析的时候既要考虑流动相又要考虑固定相,加三乙胺不宜过多,你先加1-2ml试试

我们只有Wondasil柱子的呢,1-2mL吗?那是占有水相比例多少呢?
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9楼2013-12-12 11:16:11
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

这种情况下,楼主用三乙胺调节pH值到8试一下吧。
10楼2013-12-12 11:17:37
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