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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] ASA、APX、GSH、GSSG

这些指标有没有必要都测呢?是不是有重复的?测APX是不是不用测ASA了?APX变化趋势和ASA是一致的还是相反的?GSH-ASA是一个循环吧,要测这俩APX还有必要测嘛?还有GSH-GSSG也是一个循环吧,测了GSH还有必要测GSSG吗?
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lp_0820

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by a71840584 at 2013-12-06 09:36:53
我看文献怎么是先测GSH再测GSSG呢?文献如下:
Fresh leaves (0.20 g) were homogenized in ice-cold 5% (w/v) trichloroacetic acid, centrifuged at 15,000g for 15 min, after which to 0.2 mL supernatant ad ...

试剂盒如果用GSH于DTNB反应测定,则整个反应体系是处于循环状态的,GSH与GSSG相互转化。只有在NADPH和GR存在条件下,GSH+GSSG总量为一个定值,此时,通过与DTNB反应,GSSG转化为GSH,逐步消耗NADPH,TNB量逐步增加,通过记录412 nm吸光度可以获得总GSH+GSSG量。之后,通过特定试剂处理测定GSSG含量,两个值相减获得GSH量。关于这个反应的原理我记得不是很清楚了,可能描述有误,希望懂行的虫友指正。在很多SCI文章中的还原性GSH的测定方法也是按照这个原理的。你找的方法我是头一次见到。
9楼2013-12-07 00:07:13
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查看全部 11 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

究竟测哪些酶,如何组织实验,要根据你的实验目的决定,你打算用这些数据反映什么问题。可以参考一些已发表的文献,为了说明某个类似的现象或趋势,他们都用了哪些数据。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-12-05 22:40:32
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lp_0820

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xy656691: 金币+2, 有道理 2013-12-07 10:45:13
你就列出来这几个酶,谁知道你想测定什么啊?还有最后一点,你要是想测定还原态的GSH,就必然要测GSSG。因为还原性的GSH就是通过GSSG算出来的。
3楼2013-12-06 01:28:21
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lp_0820 at 2013-12-06 01:28:21
你就列出来这几个酶,谁知道你想测定什么啊?还有最后一点,你要是想测定还原态的GSH,就必然要测GSSG。因为还原性的GSH就是通过GSSG算出来的。

我看文献怎么是先测GSH再测GSSG呢?文献如下:
Fresh leaves (0.20 g) were homogenized in ice-cold 5% (w/v) trichloroacetic acid, centrifuged at 15,000g for 15 min, after which to 0.2 mL supernatant added 2.6 ml phosphate buffer (pH 7.7) and 0.2 mL DTNB (5,5’-Dithiobis (2-nitrobenzoic acid) (2.51 mg mL1). After 5 min at 30 C, the absorbance was determined at 412 nm. GSH content was calculated based on a standard curve
GSSG content of fresh leaves (0.1 g) was measuredaccording to the GSH and GSSG Assay Kit (Sigma, USA).
第一段说测的GSH是总的GSH嘛,测了GSH再怎么算GSSG呢?
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
4楼2013-12-06 09:36:53
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