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foreest

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】怎样用谷胱甘肽单乙酯(GSH-OEt)对细胞进行预处理,增加细胞内谷胱甘肽

请问各位前辈,怎样用谷胱甘肽单乙酯(GSH-OEt)对细胞进行预处理,增加细胞内谷胱甘肽的浓度?谢谢!
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pjgwade

木虫 (著名写手)



foreest(金币+2): 谢谢参与
10mM对细胞处理两小时即可
我想问的是楼主的谷胱甘肽单乙酯是买来的还是从谷胱甘肽处理而来
4楼2012-03-24 16:32:54
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xxfan

金虫 (著名写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by pjgwade at 2012-04-06 19:19:44
楼主的单乙酯价格 请告诉我 急求 谢谢!!!

GSH-OEt购买的话,SIGMA是600多元25mg,1860元500mg,稍贵。
以下为其简便合成方法。
原来看到有人在求助,GSH-OEt哪里买?或者说怎么合成。
合成过程如下,和大家分享。
A freshly prepared solution of hydrogen
chloride (16 g, 0.45 mol) in 250 ml of
anhydrous ethanol was cooled to 20°C in
an ice bath, and 20 g (65 mmol) of glutathione
was added and dissolved by gentle
shaking. The mixture was allowed to stand
at 20°C for 2.5 h, during which time the
progress of the reaction was followed by
thin-layer chromatography (see Materials
and Methods). The solution was then
cooled to 0°C and 1.8 liter of ice-cold, dry
diethyl ether was added. The precipitate
which formed was allowed to settle for l-
3 h at 0°C. The ether was decanted and
the precipitate was washed twice with 500
ml of ice-cold ether. The product, after
drying in vacua over CaClz and KOH, was
obtained in 98% yield. The content of
glutathione monoethyl ester found on
amino acid analysis (see Materials and
Methods) varied from 90 to 98%; the other
components were glutathione and glutathione
diethyl ester. The preparations
obtained typically contained O-5% glutathione.

文献

Glutathione monoethyl ester: Preparation, uptake by tissues, and conversion to glutathione
Archives of biochemistry and biophysics
1985 Jun
239(2):538-48.
9楼2013-11-18 18:02:18
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普通回帖

fxiyue

铁杆木虫 (著名写手)



foreest(金币+2):谢谢参与
虽然不知道,但是希望你能早点得到结果,支持一下
2楼2011-03-21 20:54:19
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genomelin

银虫 (小有名气)



foreest(金币+2):谢谢参与
GSH.....大学的时候还想筛选高产菌呢。。。现在都直接诱导了,真高级。。。。。
3楼2011-03-22 02:02:22
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Rosy_yidun

铜虫 (初入文坛)



foreest(金币+2): 谢谢参与
内容已删除
5楼2012-04-01 10:21:45
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pjgwade

木虫 (著名写手)


楼主的单乙酯价格 请告诉我 急求 谢谢!!!
6楼2012-04-06 19:19:44
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aifeier

新虫 (初入文坛)



foreest(金币+2): 谢谢参与
我看到的文献是为了对比施加GSH-OEt,使细胞内GSH升高,采用了梯度,处理1h后洗去
7楼2012-04-08 19:45:18
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xxfan

金虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
见文献
Glutathione monoethyl ester: Preparation, uptake by tissues, and conversion to glutathione
Archives of biochemistry and biophysics
1985 Jun
239(2):538-48.
8楼2013-11-18 18:01:30
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淘佩塔

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,我想问一下,你的问题解决了么? 我也在做这一块,很困惑,我看文献是用30mM的GSH处理细胞1h的,但是我处理之后,细胞都死掉了,是配置的不对么?我用pbs把GSH配成120mM的,之后用含血清的培养液配成30mM的,这样做对么?谷胱甘肽单乙酯和谷胱甘肽对于孵育细胞有什么不同么?文献里就写了GSH,我以为是谷胱甘肽的,盼回复啊~~~

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10楼2014-12-25 19:21:00
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清秋牧歌

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 淘佩塔 at 2014-12-25 19:21:00
楼主,我想问一下,你的问题解决了么? 我也在做这一块,很困惑,我看文献是用30mM的GSH处理细胞1h的,但是我处理之后,细胞都死掉了,是配置的不对么?我用pbs把GSH配成120mM的,之后用含血清的培养液配成30mM的, ...

请问你看的是哪篇文献,方便透露一下吗
11楼2015-04-10 09:56:23
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)


引用回帖:
11楼: Originally posted by 清秋牧歌 at 2015-04-10 09:56:23
请问你看的是哪篇文献,方便透露一下吗...

为什么还原双硫键要用GSH-OEt啊?直接GSH不行吗?
12楼2015-10-01 11:47:38
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bbsoslolita

银虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by pjgwade at 2012-03-24 16:32:54
10mM对细胞处理两小时即可
我想问的是楼主的谷胱甘肽单乙酯是买来的还是从谷胱甘肽处理而来

为什么还原双硫键要用GSH-OEt啊?直接GSH不行吗?
13楼2015-10-01 11:47:58
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紫气vs东来

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by 淘佩塔 at 2014-12-25 19:21:00
楼主,我想问一下,你的问题解决了么? 我也在做这一块,很困惑,我看文献是用30mM的GSH处理细胞1h的,但是我处理之后,细胞都死掉了,是配置的不对么?我用pbs把GSH配成120mM的,之后用含血清的培养液配成30mM的, ...

您解决问题了吗?我也不大懂啊
14楼2016-03-10 16:18:00
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罗纳尔多沈

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 紫气vs东来 at 2016-03-10 16:18:00
您解决问题了吗?我也不大懂啊...

您好,我想请问一下谷胱甘肽和谷胱甘肽乙酯的作用差别,直接给谷胱甘肽细胞能吸收吗,为啥我看到的体外实验都是用谷胱甘肽乙酯
15楼2017-06-07 16:53:10
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罗纳尔多沈

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
10楼: Originally posted by 淘佩塔 at 2014-12-25 19:21:00
楼主,我想问一下,你的问题解决了么? 我也在做这一块,很困惑,我看文献是用30mM的GSH处理细胞1h的,但是我处理之后,细胞都死掉了,是配置的不对么?我用pbs把GSH配成120mM的,之后用含血清的培养液配成30mM的, ...

楼主,我也遇到了同样的困惑,我的体内实验用的GSH,效果做出来了,但是细胞上用GSH一直是安慰剂的效果,我都怀疑他能否进入胞内了,方便的话能否讨论一下谷胱甘肽和谷胱甘肽乙酯在细胞上的区别
16楼2017-06-07 16:54:44
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