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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] ASA、APX、GSH、GSSG

这些指标有没有必要都测呢?是不是有重复的?测APX是不是不用测ASA了?APX变化趋势和ASA是一致的还是相反的?GSH-ASA是一个循环吧,要测这俩APX还有必要测嘛?还有GSH-GSSG也是一个循环吧,测了GSH还有必要测GSSG吗?
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

究竟测哪些酶,如何组织实验,要根据你的实验目的决定,你打算用这些数据反映什么问题。可以参考一些已发表的文献,为了说明某个类似的现象或趋势,他们都用了哪些数据。
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2楼2013-12-05 22:40:32
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lp_0820

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xy656691: 金币+2, 有道理 2013-12-07 10:45:13
你就列出来这几个酶,谁知道你想测定什么啊?还有最后一点,你要是想测定还原态的GSH,就必然要测GSSG。因为还原性的GSH就是通过GSSG算出来的。
3楼2013-12-06 01:28:21
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lp_0820 at 2013-12-06 01:28:21
你就列出来这几个酶,谁知道你想测定什么啊?还有最后一点,你要是想测定还原态的GSH,就必然要测GSSG。因为还原性的GSH就是通过GSSG算出来的。

我看文献怎么是先测GSH再测GSSG呢?文献如下:
Fresh leaves (0.20 g) were homogenized in ice-cold 5% (w/v) trichloroacetic acid, centrifuged at 15,000g for 15 min, after which to 0.2 mL supernatant added 2.6 ml phosphate buffer (pH 7.7) and 0.2 mL DTNB (5,5’-Dithiobis (2-nitrobenzoic acid) (2.51 mg mL1). After 5 min at 30 C, the absorbance was determined at 412 nm. GSH content was calculated based on a standard curve
GSSG content of fresh leaves (0.1 g) was measuredaccording to the GSH and GSSG Assay Kit (Sigma, USA).
第一段说测的GSH是总的GSH嘛,测了GSH再怎么算GSSG呢?
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
4楼2013-12-06 09:36:53
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-12-05 22:40:32
究竟测哪些酶,如何组织实验,要根据你的实验目的决定,你打算用这些数据反映什么问题。可以参考一些已发表的文献,为了说明某个类似的现象或趋势,他们都用了哪些数据。

我测氧化损伤,以前只测抗氧化酶SODPODCATAPX,审稿人要求测GSH-ASA循环,所以就问问
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
5楼2013-12-06 09:37:55
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by a71840584 at 2013-12-06 09:36:53
我看文献怎么是先测GSH再测GSSG呢?文献如下:
Fresh leaves (0.20 g) were homogenized in ice-cold 5% (w/v) trichloroacetic acid, centrifuged at 15,000g for 15 min, after which to 0.2 mL supernatant ad ...

找一个GSH-GSSH测定试剂盒,看看检测原理
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6楼2013-12-06 16:55:20
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by starseacow at 2013-12-06 16:55:20
找一个GSH-GSSH测定试剂盒,看看检测原理...

用不起试剂盒。。不是非得试剂盒才能测吧,发表文献有直接测GSH的..我只想知道这个GSH是总的还是什么,有测GSH、ASA但没测GSSG的,照你和楼上大哥说的这么测就不对喽?
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7楼2013-12-06 17:40:27
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starseacow

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引用回帖:
7楼: Originally posted by a71840584 at 2013-12-06 17:40:27
用不起试剂盒。。不是非得试剂盒才能测吧,发表文献有直接测GSH的..我只想知道这个GSH是总的还是什么,有测GSH、ASA但没测GSSG的,照你和楼上大哥说的这么测就不对喽?...

我的意思是你去看看试剂盒说明,就可以理解为什么要测GSH+GSSH了
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8楼2013-12-06 18:02:00
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lp_0820

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by a71840584 at 2013-12-06 09:36:53
我看文献怎么是先测GSH再测GSSG呢?文献如下:
Fresh leaves (0.20 g) were homogenized in ice-cold 5% (w/v) trichloroacetic acid, centrifuged at 15,000g for 15 min, after which to 0.2 mL supernatant ad ...

试剂盒如果用GSH于DTNB反应测定,则整个反应体系是处于循环状态的,GSH与GSSG相互转化。只有在NADPH和GR存在条件下,GSH+GSSG总量为一个定值,此时,通过与DTNB反应,GSSG转化为GSH,逐步消耗NADPH,TNB量逐步增加,通过记录412 nm吸光度可以获得总GSH+GSSG量。之后,通过特定试剂处理测定GSSG含量,两个值相减获得GSH量。关于这个反应的原理我记得不是很清楚了,可能描述有误,希望懂行的虫友指正。在很多SCI文章中的还原性GSH的测定方法也是按照这个原理的。你找的方法我是头一次见到。
9楼2013-12-07 00:07:13
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lp_0820 at 2013-12-07 00:07:13
试剂盒如果用GSH于DTNB反应测定,则整个反应体系是处于循环状态的,GSH与GSSG相互转化。只有在NADPH和GR存在条件下,GSH+GSSG总量为一个定值,此时,通过与DTNB反应,GSSG转化为GSH,逐步消耗NADPH,TNB量逐步增加 ...

非常感谢你耐心的回答,你说的这个方法我也知道,先测总的GSH再测GSSG再用总的减去GSSG含量。我就是这个地方不理解,我查我做的方向的文献(SCI)都是按我说的那种方法,先测GSH,再测GSSG,还有的只测GSH不测GSSG的,然后再测ASA, 审稿人给我建议的时候是让我测GSH-ASA循环,而没提GSH-GSSG循环。但是我是做毒理的,我的理解是我不需要测植物体内具体的GSH含量,我有对照组的,我只需要测一下对照组和染毒组的差别,要一个变化趋势,要是相同处理的话应该不会有太大差别吧,而且有SCI文献是这么做的,不知道我的理解对不对...
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
10楼2013-12-07 10:25:17
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