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[求助]
基因表达的转化环节
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| 我把感受态细胞涂在LB固体培养基的培养皿上，然后静置一小时，之后本来是要放在37度培养的，但后来放错了，放到了4度过夜，第二天早上才放到了37度培养，虽然也长出了菌落。这样放4度过夜，会影响感受态细胞的生长吗？对实验结果会有影响吗？因为我是刚学这些东西，所以也不懂！哪位高手可以指导一下啊？谢谢! |
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10楼2013-12-05 16:03:19
bleach060452
主管区长
- MolEPI: 2
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 969.9
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- 帖子: 201
- 在线: 88.2小时
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- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2013-12-03 16:41:02
4楼2013-12-03 19:16:53
bleach060452
实习版主
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- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-04 18:28:57
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-04 18:28:57
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第一啊，楼主记得点“回复此楼”，要不我没法知道你给我留言了。。。 第二，你的描述太跳跃了，你的意思是说：连接产物由于移液器的问题不确定是否加入了感受态细胞，然后你进行了转化试验，涂板后虽然有操作失误（4度过夜），但37度培养后有阳性克隆。对吧？ 那么你是用什么方法验证的呢，你说说的电泳是PCR验证还是酶切验证的结果？ 那么我想说几点： 1. 做实验首先要规范实验操作，要不浪费实验材料，关键是浪费你自己的宝贵时间。 既然发现枪有问题，为什么不补加感受态细胞，为什么怀疑没加感受态还继续转化试验呢？ 2. 以后转化涂板后，直接37度正置培养半小时吸收、干燥菌液后，改倒置培养。 3.虽然有系列的操作失误，但是好在没有致命性的问题，所以理论上仍然有成功的可能性，那么最后如果验证成功说明你的运气爆发了。。。这都行。。。 个人见解，仅供参考 |
5楼2013-12-04 11:38:20
