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汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 2015  |  回复: 10

yinggdy

银虫 (小有名气)

[求助] 含有机溶剂流动相pH怎么测

色谱柱pH适用范围一般是2-9,我的流动相用乙腈和水,加0.1%三氟乙酸TFA,我想请问梯度洗脱时需要在乙腈里也加入和水相相同浓度的TFA吗?
混合后的pH要怎么测定呢?
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
梯度洗脱最好两相都加相同量的TFA,TFA本身紫外吸收较大,只加到一相走梯度的话基线漂移可能较大。
悲催的研发!
2楼2013-11-19 15:37:26
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yinggdy: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 好的,了解了,谢谢各位 2013-11-21 14:16:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by yinggdy at 2013-11-19 16:15:22
有机相也加TFA  pH会有变化的,这样基线不会漂移吗...

主要是TFA的紫外吸收太大,两相不加一样多走梯度肯定会很飘的
悲催的研发!
7楼2013-11-19 16:18:47
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jh9689

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般情况下测流动相的PH值实际测得是含有缓冲盐的水相的PH值,即混合之前溶解了缓冲盐的水的PH值,一般所说的调节流动相的PH值也说的就是这个。一般是不测混合后的流动相的PH值的。
做分析的,大家多交流
9楼2013-11-19 20:26:08
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e_liang369

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yinggdy at 2013-11-19 16:37:28
但是这样pH就超出了柱子的耐受范围怎么办呢?...

两相中均加0.1%的tfa对2-9PH的色谱柱是绝对没有问题的,而且还有可能优化你色谱柱的硅羟残基。
悲催的研发!
10楼2013-11-20 08:42:24
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普通回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

0.1%的TFA水溶液的PH值是小于2的,但是正常使用色谱柱不会有问题的,甚至越用越好。
悲催的研发!
3楼2013-11-19 15:40:02
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yinggdy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-11-19 15:40:02
0.1%的TFA水溶液的PH值是小于2的,但是正常使用色谱柱不会有问题的,甚至越用越好。

可是柱子耐受的最小pH就是2,我用pH计测混合溶液pH,发现有机溶剂含量越大pH越小,而且0.01%的TFA都是是小于2的
4楼2013-11-19 16:14:03
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yinggdy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-11-19 15:37:26
梯度洗脱最好两相都加相同量的TFA,TFA本身紫外吸收较大,只加到一相走梯度的话基线漂移可能较大。

有机相也加TFA  pH会有变化的,这样基线不会漂移吗
5楼2013-11-19 16:15:22
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e_liang369

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yinggdy at 2013-11-19 16:14:03
可是柱子耐受的最小pH就是2,我用pH计测混合溶液pH,发现有机溶剂含量越大pH越小,而且0.01%的TFA都是是小于2的...

绝对是没有问题的
悲催的研发!
6楼2013-11-19 16:17:22
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yinggdy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-11-19 16:18:47
主要是TFA的紫外吸收太大,两相不加一样多走梯度肯定会很飘的...

但是这样pH就超出了柱子的耐受范围怎么办呢?
8楼2013-11-19 16:37:28
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