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sicau_yang金虫 (小有名气)
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[交流]
关于pET32a空载分子量的问题 已有1人参与
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文章审稿人提出一个问题，是关于pET32a融合表达蛋白分子量的问题，question如下“Authors expressed their recombinant protein using the pET32a from Novagen. According to the Novagen website: "The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fused with the 109 aa Trx*Tag? thioredoxin protein". Then, the rTpFABP is not fused with an histidine Tag but with the thioredoxin. Then, considering that the rTpFABP and the thioredoxin protein have a sequence of 133aa and 109aa, respectively, the theoretical molecular weight of the fusion protein should be around 25kDa. How authors explain the difference with the 36.1 kDa indicated in the "rTpFABP expression and Western blotting" section page 11? Did authors fused something else than the thioredoxin and the His tag (negligible in molecular weight)?” 一般来说pET32a空载的话分子量大约为21kDa，我的蛋白分子量大约为15kda，不知道review怎么算的，融合分子量只有25kd，大家怎么看呢？谢谢。 |
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