版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (2435)
>硕博家园 (1015)
>虫友互识 (1011)
>导师招生 (156)
>考博 (111)
>海外博后 (100)
>博后之家 (94)
>学术会议 (64)
>休闲灌水 (43)
>催化 (33)
>招聘信息布告栏 (30)
>论文投稿 (22)
>文献求助 (11)
>电化学 (10)
>考研 (10)
>科研资料 (7)

返回列表

zhuangkai520

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 788.8
帖子: 77
在线: 33.1小时
虫号: 2595283
注册: 2013-08-13
性别: GG
专业: 环境微生物学

[求助] 各位大神们小弟求助有一质粒我想知道里面的序列不知道怎么弄？？？？

我是从污水中筛选出的耐药大肠杆菌，想提取其中的有抗性基因的质粒进行测序，看后续实验对抗性基因-质粒的影响，应该怎么办呢？？？

回复此楼

» 猜你喜欢

WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有135人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

地理分布上相差甚远的非结合型质粒具有完全相同的核苷酸序列？已经有3人回复
得到一个质粒序列后，如何进行分析？已经有4人回复
求问各位大神，有没有快速批量比对16S或ITS序列的软件或方法？已经有9人回复
目的基因连接到克隆载体后提取质粒测序，序列有问题已经有11人回复
克隆提取质粒测序结果怎么跟大肠杆菌菌液测序结果序列比对差异很大啊？已经有4人回复
哪位有pcDNA4.1的序列和质粒图谱？已经有3人回复
新手：请问怎么查找质粒全基因组序列，pRR88，psp72,pcDNA3.1 已经有8人回复
【求助/交流】原核表达去载体序列被翻译后该如何去掉已经有5人回复

深圳的东北人

1楼 2013-11-15 09:42:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

专家经验: +24
MolEPI: 31
应助: 599 (博士)
贵宾: 2.689
金币: 24338.9
散金: 1088
红花: 88
沙发: 2
帖子: 2327
在线: 623.1小时
虫号: 849017
注册: 2009-09-16
性别: GG
专业: 细胞信号转导
管辖: 分子生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-15 16:12:14

我个人愚见：
1. 从该株大肠杆菌中提取出所有质粒，该大肠杆菌可能含不止一种质粒

2. 然后这些质粒的混合体转化大肠杆菌DH5a或者其他克隆菌株用你的那个药筛选

3. 阳性菌株培养提取质粒

4. 想办法测序这个质粒

赞一下(2人)

回复此楼

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com

2楼2013-11-15 10:09:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jennifermatt

木虫 (小有名气)

应助: 29 (小学生)
金币: 3377.4
散金: 21
红花: 2
帖子: 177
在线: 55.7小时
虫号: 2646711
注册: 2013-09-11
性别: MM
专业: 微生物学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-15 16:16:53

提取质粒，转化，amp/kana/氯霉素筛选阳性，再提质粒。10微升测序。

赞一下

回复此楼

求是

3楼2013-11-15 10:42:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhuangkai520

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 788.8
帖子: 77
在线: 33.1小时
虫号: 2595283
注册: 2013-08-13
性别: GG
专业: 环境微生物学

引用回帖:

2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-15 10:09:03
我个人愚见：
1. 从该株大肠杆菌中提取出所有质粒，该大肠杆菌可能含不止一种质粒

2. 然后这些质粒的混合体转化大肠杆菌DH5a或者其他克隆菌株用你的那个药筛选

3. 阳性菌株培养提取质粒

4. 想办法测序这个 ...

那这个质粒应该怎么测序啊？没什么谱？

赞一下

回复此楼

深圳的东北人

4楼2013-11-15 11:56:02

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖