应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DNA酶I的反应液 Tris-HCl pH=7
41/1返回列表
查看: 892  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] DNA酶I的反应液 Tris-HCl pH=7 已有1人参与

各位大侠好！
请问：如下的DNA 酶I from bovine pancreas(sigma DN25)的反应缓冲液的配制方法(3倍的Tris-HCl buffer，50mL定容)正确吗？
首先将Tris （3mg）及MgSO4 （60mg）溶解在40mL的水里，然后用HCl和NaOH 调pH=7，然后补足水至50mL。
我在网上搜索到正常的酶反应液10mM Tris-HCl(pH7.5), 25mM MgCl2，1mM CaCl2。计算与比较之后，发现我的步骤里面Tris质量相差极大。
请问DNA酶I的缓冲液到底该怎样配呢？先谢谢啦！

[ Last edited by wangdandelia on 2013-11-13 at 04:40 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-13 03:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-11-13 17:22:08
Tris调pH只用到盐酸，不用NaOH，因为比纯tris更碱性的pH下没有缓冲作用。
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-13 04:29:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-13 04:29:52
Tris调pH只用到盐酸，不用NaOH，因为比纯tris更碱性的pH下没有缓冲作用。

请问Tris的浓度到底是多少呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-13 14:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangdandelia at 2013-11-13 14:55:31
请问Tris的浓度到底是多少呢？
...

你需要多少用多少。常用的缓冲液通常都是配成一定pH，浓度较高的母液（通常是1M）。工作液中缓冲液的浓度一般不高，你的实验需要多少，直接从母液稀释。
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-14 02:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangdandelia 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭