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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pH 7.5 的 Tris-HCl 的配制问题
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含羞草liu

新虫 (小有名气)

[求助] pH 7.5 的 Tris-HCl 的配制问题

大家好！今天我配制了Tris-HCl，要调pH 7.5。我先称量了121.1g的Tris，用800ml ddH2O溶解后，加浓HCl 50ml，结果用pH计检测得pH 7.3多，因为担心引入其他离子，没敢用NaOH回调。我想问下，这个高压灭菌后能不能当pH 7.5 的 Tris-HCl 使用？请大家帮个忙！谢谢！
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努力，奋斗，拼搏。。。
1楼 2012-10-09 18:40:40
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
含羞草liu: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-10-10 11:22:53
加入浓盐酸后温度比常温高，等降到常温了pH就会高一点，Tris随温度负相关。如果你要常温下pH7•5，可以用，不需要那么精确，科学都是不严谨的，我就这么觉得
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谢谢你给我信心与力量，我会努力！
2楼2012-10-09 18:53:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些缓冲液的pH受温度影响较大，你的Tris是在什么温度下用就把它冷却到那个温度再看看pH。
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3楼2012-10-10 08:48:29
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青豆同学

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-11 11:12:28
我测了一下pH，确实灭菌前后没有改变，仍是7.72。这样的话，可以当作pH 7.5 用吗? 我是建文库时用来配1X dilution buffer的。可以将就着用吗？...

这个我也不知道。。。如果要求严格的话，你就再称点Tris，比如你配了1L的量，再称个100ml的量的Tris加进去，直接调pH然后水补齐到1，1L
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含羞草liu
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8楼2012-10-11 18:32:17
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普通回帖

含羞草liu

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-09 18:53:13
加入浓盐酸后温度比常温高，等降到常温了pH就会高一点，Tris随温度负相关。如果你要常温下pH7•5，可以用，不需要那么精确，科学都是不严谨的，我就这么觉得

确实如此，我冷却了一夜，今天再测，pH已经到7.72了，现在又比7.5高了，不知道这样可不可以当pH 7.5 用？还有，我还要高压灭菌，灭菌之后，其pH会不会降低一点呢？
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4楼2012-10-10 11:22:37
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Pooooppy

银虫 (初入文坛)
关于灭菌这个问题 我觉得用无菌水来配制缓冲液比较靠谱~ 个人意见啦 慎拍
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5楼2012-10-10 15:44:22
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青豆同学

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-10 11:22:37
确实如此，我冷却了一夜，今天再测，pH已经到7.72了，现在又比7.5高了，不知道这样可不可以当pH 7.5 用？还有，我还要高压灭菌，灭菌之后，其pH会不会降低一点呢？...

如果样品已经充分混匀并静置了一段时间，灭菌前后不会变化
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6楼2012-10-10 18:37:40
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含羞草liu

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-10 18:37:40
如果样品已经充分混匀并静置了一段时间，灭菌前后不会变化...

我测了一下pH，确实灭菌前后没有改变，仍是7.72。这样的话，可以当作pH 7.5 用吗? 我是建文库时用来配1X dilution buffer的。可以将就着用吗？
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努力，奋斗，拼搏。。。
7楼2012-10-11 11:12:28
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含羞草liu

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-11 18:32:17
这个我也不知道。。。如果要求严格的话，你就再称点Tris，比如你配了1L的量，再称个100ml的量的Tris加进去，直接调pH然后水补齐到1，1L...

是哦，是个好办法，呵呵，谢谢哦！
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努力，奋斗，拼搏。。。
9楼2012-10-12 08:47:46
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青豆同学

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-12 08:47:46
是哦，是个好办法，呵呵，谢谢哦！...

客气了  呵呵
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10楼2012-10-12 20:01:01
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