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含羞草liu

新虫 (小有名气)

[求助] pH 7.5 的 Tris-HCl 的配制问题

大家好!今天我配制了Tris-HCl,要调pH 7.5。我先称量了121.1g的Tris,用800ml ddH2O溶解后,加浓HCl 50ml,结果用pH计检测得pH 7.3多,因为担心引入其他离子,没敢用NaOH回调。我想问下,这个高压灭菌后能不能当pH 7.5 的 Tris-HCl 使用?请大家帮个忙!谢谢!
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努力,奋斗,拼搏。。。
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
含羞草liu: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-10-10 11:22:53
加入浓盐酸后温度比常温高,等降到常温了pH就会高一点,Tris随温度负相关。如果你要常温下pH7•5,可以用,不需要那么精确,科学都是不严谨的,我就这么觉得
谢谢你给我信心与力量,我会努力!
2楼2012-10-09 18:53:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些缓冲液的pH受温度影响较大,你的Tris是在什么温度下用就把它冷却到那个温度再看看pH。
3楼2012-10-10 08:48:29
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-11 11:12:28
我测了一下pH,确实灭菌前后没有改变,仍是7.72。这样的话,可以当作pH 7.5 用吗? 我是建文库时用来配1X dilution buffer的。可以将就着用吗?...

这个我也不知道。。。如果要求严格的话,你就再称点Tris,比如你配了1L的量,再称个100ml的量的Tris加进去,直接调pH然后水补齐到1,1L

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谢谢你给我信心与力量,我会努力!
8楼2012-10-11 18:32:17
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普通回帖

含羞草liu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-09 18:53:13
加入浓盐酸后温度比常温高,等降到常温了pH就会高一点,Tris随温度负相关。如果你要常温下pH7•5,可以用,不需要那么精确,科学都是不严谨的,我就这么觉得

确实如此,我冷却了一夜,今天再测,pH已经到7.72了,现在又比7.5高了,不知道这样可不可以当pH 7.5 用?还有,我还要高压灭菌,灭菌之后,其pH会不会降低一点呢?
努力,奋斗,拼搏。。。
4楼2012-10-10 11:22:37
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Pooooppy

银虫 (初入文坛)

关于灭菌这个问题 我觉得用无菌水来配制缓冲液比较靠谱~ 个人意见啦 慎拍
5楼2012-10-10 15:44:22
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-10 11:22:37
确实如此,我冷却了一夜,今天再测,pH已经到7.72了,现在又比7.5高了,不知道这样可不可以当pH 7.5 用?还有,我还要高压灭菌,灭菌之后,其pH会不会降低一点呢?...

如果样品已经充分混匀并静置了一段时间,灭菌前后不会变化
谢谢你给我信心与力量,我会努力!
6楼2012-10-10 18:37:40
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含羞草liu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-10 18:37:40
如果样品已经充分混匀并静置了一段时间,灭菌前后不会变化...

我测了一下pH,确实灭菌前后没有改变,仍是7.72。这样的话,可以当作pH 7.5 用吗? 我是建文库时用来配1X dilution buffer的。可以将就着用吗?
努力,奋斗,拼搏。。。
7楼2012-10-11 11:12:28
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含羞草liu

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 青豆同学 at 2012-10-11 18:32:17
这个我也不知道。。。如果要求严格的话,你就再称点Tris,比如你配了1L的量,再称个100ml的量的Tris加进去,直接调pH然后水补齐到1,1L...

是哦,是个好办法,呵呵,谢谢哦!
努力,奋斗,拼搏。。。
9楼2012-10-12 08:47:46
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 含羞草liu at 2012-10-12 08:47:46
是哦,是个好办法,呵呵,谢谢哦!...

客气了  呵呵
谢谢你给我信心与力量,我会努力!
10楼2012-10-12 20:01:01
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