应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酵母原生质体的生成
451/1返回列表
查看: 2404  |  回复: 44
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

二月客

铁杆木虫 (职业作家)

[交流] 酵母原生质体的生成

我最近做酵母的原生质体的生成，用的是柠檬酸-磷酸氢二钾缓冲体系，pH 6点多一点，我用巯基乙醇处理后，离心，然后直接用蜗牛酶处理，破壁后，用缓冲液洗涤后，就稀释一定倍数，涂布于YPD（不是高渗YPD培养基）上，计算原生体生成率，以没有处理的为原始的对照，结果生成的原生质体量都很少或者几乎没有生成原生质体，请问大侠是怎么回事？酵母为热带假丝酵母和酿酒酵母，蜗牛酶是从上海生工订的，酶量用到了10%都无效。谢谢大侠们指导。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-11-11 09:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiuqyang

金虫 (小有名气)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
我想你在消化过程中，应该做个镜检，原生质体是球形，很容易看到的，间隔取样看俺，在找找原因
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-12 08:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

茅塞顿开

至尊木虫 (文坛精英)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
顶起
回复此楼
3楼2013-11-12 08:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhx00555

至尊木虫 (文坛精英)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
zhufu
回复此楼
5楼2013-11-12 09:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trimmy

木虫 (职业作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
路过

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
9楼2013-11-12 10:11:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芍药笼烟

铁杆木虫 (职业作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
祝楼主一切顺利，家人健康快乐，爱人开心幸福！
赞一下 回复此楼
16楼2013-11-12 11:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1921952610

铁虫 (正式写手)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
你查查文献。似乎还要加纤维素酶。你查查看。我记得不是很清楚。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
18楼2013-11-12 14:20:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gitme3388

铁虫 (知名作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
愿楼主心想事成
回复此楼
20楼2013-11-12 15:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
blessing
回复此楼
23楼2013-11-12 16:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchfan

木虫 (知名作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
Good luck
回复此楼
25楼2013-11-12 16:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lastpython

木虫 (职业作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
Good luck
回复此楼
26楼2013-11-12 16:22:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heibi

金虫 (文坛精英)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
愿楼主心想事成
回复此楼
27楼2013-11-12 16:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shin_ichi

新虫 (初入文坛)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
酵母不太懂，我做丝状真菌用溶壁酶
赞一下 回复此楼
28楼2013-11-12 22:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fakebook

木虫 (文坛精英)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
Good luck
回复此楼
34楼2013-11-13 00:22:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

checkin

银虫 (知名作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
Best wishes
回复此楼
35楼2013-11-13 00:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niu.bi

木虫 (文坛精英)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
回复此楼
36楼2013-11-13 04:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herome

金虫 (知名作家)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
深深祝福
回复此楼
42楼2013-11-13 08:19:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzx6174

铁虫 (初入文坛)
★
二月客(金币+1): 谢谢参与
建议不要用缓冲液洗破壁后的原生质体了，原生质体太容易破了，可以试试浓度稍高一点点的生理盐水，还有要注意酶解的时间，建议对时间做一个梯度优化，隔一定时间做一个镜鉴，还有，你的酶浓太高了吧，我做丝状真菌的，用的是混合酶系，你也可以试试，我酶浓才3%-5%
赞一下(1人) 回复此楼
45楼2013-11-13 10:51:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
userhung4楼
2013-11-12 09:06   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
wlxiao6楼
2013-11-12 09:27   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
假大空7楼
2013-11-12 09:45   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
haixiawu8楼
2013-11-12 09:50   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
dlbrians10楼
2013-11-12 10:13   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
xianzhi201011楼
2013-11-12 10:14   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
87768295212楼
2013-11-12 10:18   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
shupingszh13楼
2013-11-12 10:22   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
jdhonglu14楼
2013-11-12 10:24   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
tangbohejin15楼
2013-11-12 10:29   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
cqwhch17楼
2013-11-12 11:07   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
xiejf19楼
2013-11-12 15:03   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
ohcesc21楼
2013-11-12 15:10   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
aboluo19833122楼
2013-11-12 15:32   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
westlife91124楼
2013-11-12 16:22   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
1
zhchzhsh207629楼
2013-11-12 22:49   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
ts_chenchao30楼
2013-11-12 23:04   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
lefantian12231楼
2013-11-12 23:12   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
virologik32楼
2013-11-12 23:30   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
hppdyx33楼
2013-11-12 23:47   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
祝福 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
jinwei33137楼
2013-11-13 06:26   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
doublehaohao38楼
2013-11-13 06:52   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
辉靓实验39楼
2013-11-13 06:58   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
段小飞40楼
2013-11-13 08:07   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
chendiqing41楼
2013-11-13 08:18   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
readytogo43楼
2013-11-13 08:22   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
Spinage44楼
2013-11-13 08:47   回复  
二月客(金币+1): 谢谢参与
顶
相关版块跳转 我要订阅楼主 二月客 的主题更新
451/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭