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酵母原生质体的生成
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二月客
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[交流]
酵母原生质体的生成
我最近做酵母的原生质体的生成,用的是柠檬酸-磷酸氢二钾缓冲体系,pH 6点多一点,我用巯基乙醇处理后,离心,然后直接用蜗牛酶处理,破壁后,用缓冲液洗涤后,就稀释一定倍数,涂布于YPD(不是高渗YPD培养基)上,计算原生体生成率,以没有处理的为原始的对照,结果生成的原生质体量都很少或者几乎没有生成原生质体,请问大侠是怎么回事?酵母为热带假丝酵母和酿酒酵母,蜗牛酶是从上海生工订的,酶量用到了10%都无效。谢谢大侠们指导。
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2013-11-11 09:57:40
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铁虫
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二月客(金币+1): 谢谢参与
你查查文献。似乎还要加纤维素酶。你查查看。我记得不是很清楚。
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18楼
2013-11-12 14:20:23
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xiuqyang
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★
二月客(金币+1): 谢谢参与
我想你在消化过程中,应该做个镜检,原生质体是球形,很容易看到的,间隔取样看俺,在找找原因
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2楼
2013-11-12 08:36:01
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trimmy
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二月客(金币+1): 谢谢参与
路过
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9楼
2013-11-12 10:11:33
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