24小时热门版块排行榜    

查看: 1453  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] 最近做转化快疯掉了

因为定量DNA的nano好像不好用了,所以只能通过肉眼看DNA浓度。
    酶切胶回收后跑电泳,感觉浓度还可以,可是连接转化后,就是不长菌落!
   PCR产物连T载体成功,说明连接酶没问题。用对照质粒转化成功,说明转化没问题。难道是酶切这步有什么问题吗?
   做了好多次都失败了,要崩溃了,求大神帮助啊,给些指点。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天使托 at 2013-11-07 23:45:01
不知道你想表达啥意思?
说明白些好嘛?
是不是想将目的DNA连接至某vector呢?

不好意思,好像我描述的确实有点不清楚,其实实验很简单,就是从T载体上把我的目的片段切下来连到表达载体上。酶切后琼脂糖电泳看,效果挺好的。胶回收后我也会跑个胶看一看。转化有对照所以没问题。所以不知道还可能有什么其他的问题
7楼2013-11-08 21:30:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

肉眼看DNA浓度

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-11-07 22:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-11-07 22:52:42
肉眼看DNA浓度

琼脂糖电泳嘛,看亮度了,能给些建议不
3楼2013-11-07 22:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-11-08 08:23:19
不知道你想表达啥意思?
说明白些好嘛?
是不是想将目的DNA连接至某vector呢?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2013-11-07 23:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见