| 查看: 4618 | 回复: 21 | |||
[求助]
氨基DNA与羧基CdTe量子点的连接
|
|||
| 各位大侠，小虫一直尝试EDC/NHS连接氨基DNA和羧基CdTe量子点，都没能成功，参考的文献做法不大一样，但原理应该是一致的，不知问题出在哪儿，焦急等待大侠相助！！！我用的缓冲液是PB，活化液pH为6.0，50mM，不另外加盐；反应液pH为7.4，10mM，另外含有100mM的KCl！尝试用pH6.0的缓冲液溶解量子点，并加入一定量的EDC/NHS（约100倍于量子点的浓度），经活化后，放置一夜，有黑色颗粒或絮状沉淀产生，此时还有荧光，当离心后，上清液无荧光，将黑色颗粒超声分散到pH7.4的缓冲液后，再测没有荧光了！还尝试过直接用pH7.4 的缓冲液直接加EDC/NHS活化2h，后加入DNA 的，最后溶液也没了荧光。前后两次的溶液都为2mL，量子点浓度约为50nM，DNA为0.75uM！求助各位有经验的大侠相助，会追加金币！！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 羧基活化EDC|DCC,NHS |
» 猜你喜欢
北京航空航天大学26级博士招生-生物医学工程-合成生物学
已经有20人回复
-
温州大学王娟课题组2026年招生
已经有10人回复
-
金属材料论文润色/翻译怎么收费?
已经有253人回复
-
温州大学2026年招生（化学、材料）
已经有10人回复
-
招生负责_院士团队_学生高自由度成长_擅长学生培养
已经有5人回复
-
温州大学招收2026年入学博士研究生（化学、材料、环境）
已经有10人回复
-
非晶合金
已经有2人回复
-
院士团队-每届学生都优秀-高自由度-团队氛围好
已经有0人回复
-
求调剂
已经有1人回复
-
化工学院（学院正式调剂群+联系方式）
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助量子点上连接DNA的问题
已经有19人回复
- CdTe量子点合成遇到的问题
已经有11人回复
- CdTe量子点合成出来的量为什么很少？做不了XRD，怎么办？
已经有10人回复
- 用反胶束法对CdTe量子点进行包硅求助~
已经有5人回复
- 量子点生物荧光探针的制备及应用
已经有251人回复
- 求助：CdTe量子点表面分子印迹！！
已经有5人回复
- 氨基量子点 反应比例
已经有5人回复
- TGA修饰的CdTe量子点与BSA作用后，量子点荧光发射蓝移，原因？
已经有3人回复
- CdTe量子点二氧化钛太阳能电池的电解质和对电极选择
已经有7人回复
- 求助一下 拿量子点CdTe偶联单克隆抗体小鼠的IgG 做出来TEM是如图所示
已经有11人回复
- 水溶性巯基丙酸稳定的CdTe量子点最大发射波长
已经有10人回复
- CdTe量子点的合成
已经有15人回复
- 关于CdTe量子点的合成
已经有17人回复
- 关于水溶性CdTe量子点纯化的问题？
已经有9人回复
- CdTe量子点溶于Tris-HCl，谢谢
已经有7人回复
- 急求CdTe量子点的work function以及HOMO和LUMO。谢谢！
已经有7人回复
- 【请教】CdTe量子点的TEM制样
已经有19人回复
- 【请教】CdTe量子点紫外吸收图
已经有16人回复
4楼2013-11-12 14:49:41
lucasone
木虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 4620.2
- 红花: 3
- 帖子: 223
- 在线: 352.3小时
- 虫号: 679726
- 注册: 2008-12-22
- 性别: GG
- 专业: 无机纳米化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
benpaopinle: 金币+10, ★★★很有帮助, 有知道了不少！谢谢！ 2013-11-19 10:24:58
benpaopinle: 金币+10, ★★★很有帮助, 有知道了不少！谢谢！ 2013-11-19 10:24:58
| 第一种情况可以很明确的回答你，羧基稳定的量子点（MPA或者TGA），是不能在酸性条件下稳定存在的，所以你的6.0的缓冲溶液是不行的，酸性条件下会导致量子点团聚沉淀，然后没有荧光；你的第二种方法应该是正确的，一般用超滤管先小转速离心，出去溶液中多余的稳定剂或者一些Cd和稳定剂的络合物，然后用7.4的PBS重新分散量子点，随后加入EDC和NHS搅拌活化，在加入DNA或者抗原抗体搅拌反应，然后4度过夜保存，第二天用紫外，荧光，红外或者是动态光散射表征。 |
9楼2013-11-18 14:48:29
12楼2013-11-19 10:40:27
ypgou123
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 954.5
- 帖子: 84
- 在线: 99.5小时
- 虫号: 1439713
- 注册: 2011-10-12
- 性别: MM
- 专业: 生物物理化学
2楼2013-11-11 21:53:54
匿名
用户注销 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3412.5
- 散金: 72
- 帖子: 89
- 在线: 68.4小时
- 虫号: 0
- 注册: 2013-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
 本帖仅楼主可见 |
3楼2013-11-12 00:08:51
|
真是不好意思，关于这个问题，我也是很迷茫，没有很好的表征手段！我查过文献，也询问过师兄、老师，都没有什么好的方法啊！比如说从荧光方面，有文献报道QDs修饰上DNA后表面缺陷减少，荧光强度增强，但也有说荧光强度下降的，比如被DNA猝灭，但并没有具体说明为什么；荧光发射位置前后不变或移动很小。有关于紫外的变化，目前我也没怎么尝试，因为样品量太少，没法处理，但从文献上看，肯定有DNA的紫外峰，何况还能根据DNA的吸收强度估算每个量子点上修饰了几条DNA。除了荧光、紫外，红外也可以检测酰胺键来判断是否有修饰上。动态光散射也可以根据修饰前后QDs的水力半径来粗略估计，但样品肯定是经过离心洗脱后的了。除上面的手段外，我真不知道该怎么表征，TEM和SEM应该看不到量子点表面的DNA啊，我真的也是很纠结...说这么多，也不知道你是怎样修饰的？希望可以交流一下！ |
5楼2013-11-12 15:15:56
supernatural: 屏蔽内容, 请不要在回帖中留下联系方式，这既是版规也是为了用户自身的信息安全考虑，联系方式可以站内留额O(∩_∩)O~ 2013-11-19 11:17:48
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2013-11-13 11:36:29
huterx
金虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1485.5
- 散金: 300
- 红花: 2
- 帖子: 193
- 在线: 432.8小时
- 虫号: 1380155
- 注册: 2011-08-26
- 专业: 凝聚态物性 II ：电子结构
7楼2013-11-17 22:19:25
conanzzz
木虫 (正式写手)
- 应助: 76 (初中生)
- 金币: 4633.5
- 散金: 248
- 红花: 5
- 帖子: 524
- 在线: 383小时
- 虫号: 818114
- 注册: 2009-07-29
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
8楼2013-11-18 11:49:53
10楼2013-11-19 10:18:58
