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benpaopinle

金虫 (小有名气)

[求助] 氨基DNA与羧基CdTe量子点的连接

各位大侠,小虫一直尝试EDC/NHS连接氨基DNA和羧基CdTe量子点,都没能成功,参考的文献做法不大一样,但原理应该是一致的,不知问题出在哪儿,焦急等待大侠相助!!!我用的缓冲液是PB,活化液pH为6.0,50mM,不另外加盐;反应液pH为7.4,10mM,另外含有100mM的KCl!尝试用pH6.0的缓冲液溶解量子点,并加入一定量的EDC/NHS(约100倍于量子点的浓度),经活化后,放置一夜,有黑色颗粒或絮状沉淀产生,此时还有荧光,当离心后,上清液无荧光,将黑色颗粒超声分散到pH7.4的缓冲液后,再测没有荧光了!还尝试过直接用pH7.4 的缓冲液直接加EDC/NHS活化2h,后加入DNA 的,最后溶液也没了荧光。前后两次的溶液都为2mL,量子点浓度约为50nM,DNA为0.75uM!求助各位有经验的大侠相助,会追加金币!!!
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

LZ,首先因为你用的CdTe QD,我觉得你那个黑色颗粒是已经破坏掉的QD成分,因为我们的CdTe沉聚破坏后就是这种情况;其次,这楼里应该也挺多关注这个EDC/NHS偶联羧基QD和氨基DNA的,但是MS大家都遇到同样的问题包括我自己也是,我个人觉得是都没有偶联上,所以无从表征。
8楼2013-11-18 11:49:53
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conanzzz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by benpaopinle at 2013-11-19 10:18:58
好吧,还是很感谢你的回复,实属无奈啊!...

同病相怜,我觉得可以好好请教下LSS同学,他说的比较详细在理~~
11楼2013-11-19 10:34:23
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