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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用过Bio-rad转膜系统turbo的请帮忙~
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yumeng_6964

金虫 (小有名气)

[求助] 用过Bio-rad转膜系统turbo的请帮忙~ 已有2人参与

我没用BIO-RAD的转膜液，用了自己配的转膜液（1L转膜液中，2.9g Tris+5.8g 甘氨酸+0.37g SDS，25V恒压转膜30min后发现胶上预染marker未转到膜上，后又转45min，发现还是未转上），请问该怎么办？

膜是PVDF，用甲醇泡过20s左右；转膜液中也加了甲醇。

追加：刚才发过之后，又看了好多贴 发现转膜时间都很长 我就重新换了转膜液、膜和滤纸，用25V跑了90min，结果打开cassette发现上板有一块烧焦了 胶也变黄了 但是marker还是没有转到膜上……

肿么办啊？

[ Last edited by yumeng_6964 on 2013-11-3 at 18:23 ]
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1楼 2013-11-03 16:05:44
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中华魂4466

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转的时间大概5分钟，有时候还更快，所以你得摸索下。我们转膜转长了也是转不出来

[ 发自小木虫客户端 ]
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没有过不去的坎，回头一下继续向前！
2楼2014-10-10 11:27:40
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hl5210

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

25V?我用的是15V，转35Min.90分钟也太长了吧，我的转移缓冲液配方是Tris 3.03g , 甘氨酸14.4,200ml 甲醇，加水到1000ml，然后加2.5-10ml的10%的SDS
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3楼2014-10-11 20:52:32
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