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求助，吡嗪酰胺液相分析
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现在在摸索一个分析吡嗪酰胺和它代谢物的液相方法，目前用的是C18柱，流动相是甲醇-乙酸铵，甲酸，但因为物质极性很大，等度洗脱，出峰很早，最早的一个目标峰在3.5min左右出峰，最晚的一个6分钟左右也就出来了，水相比例已经达到90%了，不能再提高水相比例来延长出峰时间了，然后跑了一下空白血浆，分别用甲醇和三氯乙酸沉淀蛋白，但内源性杂质峰都在3~4min左右，对待测物有干扰，有试过梯度，大概是2min内高比例水相冲洗，然后提高甲醇相，让目标峰在4~9分钟内出来，再继续提高甲醇相，希望让杂质出峰，然后又回复高比例水相，但结果是最早的一个目标峰推迟到5分钟左右了，但杂质峰也是那个时间出峰，还是没有办法把杂质峰和目标峰分开。 调甲酸、调流动相的方法已经试了很多了，感觉改变不明显，现在就想知道梯度这个还能怎么调吗？或者不行就只有换柱子了，没有钱买纯水柱，想换个氨基柱或氰基柱试试，不知道可以吗？我的待测物极性都蛮大的，一个是含有酰胺基 一个是含有羧基，不知道各位还有什么办法吗？？ 先谢谢大家了，求大家帮忙！ |
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2楼2017-06-19 09:15:10