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zhuting8808

木虫 (小有名气)

[求助] 求助液相色谱柱基线不平

岛津的液相,色谱柱是依利特Hypersil ODS2填料的柱子,250*4.6/5um,前段时间做了缓冲盐可能是没有冲干净,用纯甲醇冲柱是的柱压在9左右,现在用5%甲醇冲了半天基线稳定,但是换50%甲醇冲基线一直不平,一节一节的往上漂(放大十个单位看),请问各位这是怎么回事。谢谢!
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32862500

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+2, 感谢应助,欢迎常来分析版交流~ 2012-11-30 10:28:07
zhuting8808: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-03 09:08:50
先用5%甲醇水溶液 冲洗2小时
然后用甲醇比水 梯度由5%到75% 时间0到50分钟(循环3次)
然后用100%甲醇 冲洗1h

这样看看有没有效果
2楼2012-11-30 10:09:07
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zhuting8808

木虫 (小有名气)

我们的液相是单泵,不能做梯度哦~~
3楼2012-11-30 11:21:30
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mry小布丁

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+2, 鼓励新虫交流~~ 2012-11-30 21:41:36
zhuting8808: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-03 09:09:03
原因有:1.盐浓度大,导致系统压力大2.检测池脏了,可以不接柱子,用直通充一下系统,3.可能是没接地线,压力不稳,4.    没开泵5.波长选的低

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
不甘于眼前
4楼2012-11-30 14:46:05
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mikey_m

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
单泵用着很费劲啊
那你多配几个浓度的溶液 由低到高的轮换冲洗吧
5楼2012-11-30 15:34:48
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296026840

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhuting8808: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-03 09:09:16
换5%的乙腈溶液冲机子试试
三人行必有我师
6楼2012-11-30 20:22:58
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小娜-小宇

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhuting8808: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-03 09:09:35
肯定柱子堵塞了,先5%甲醇冲平稳后,换剃度又开始不稳,压力是否也一直升高?多跑几针不同比例  水±甲醇。,的空白就好咯

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
少吃多滋味,保持微笑
7楼2012-11-30 20:36:14
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhuting8808: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-03 09:10:02
纯水做流动相走20倍柱体积,期间注入二甲基亚砜大约100-200ul,分多次次注入,然然后甲醇冲洗20倍柱体积,然后氯仿冲洗20倍柱体积,然后甲醇冲洗。
8楼2012-12-01 08:18:45
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wangcl1969

至尊木虫 (著名写手)

基线不平可能压力不稳,说明缓冲液的盐分没干净,还是要多冲洗
9楼2012-12-02 16:09:43
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zhuting8808

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小娜-小宇 at 2012-11-30 20:36:14
肯定柱子堵塞了,先5%甲醇冲平稳后,换剃度又开始不稳,压力是否也一直升高?多跑几针不同比例  水±甲醇。,的空白就好咯

压力有轻微跳动,0.3个单位
10楼2012-12-03 09:08:01
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