24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 4378  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

quxd

金虫 (正式写手)

[交流] Ecoli BL21 DE3表达蛋白时突然变澄清,但非噬菌体污染,究竟是怎么回事? 已有11人参与

最近利用Ecoli BL21 DE3/pET28a生产蛋白,小摇瓶培养很正常,IPTG诱导后蛋白活性也很好;但在7L发酵罐中,起初培养还算正常,加入IPTG之后不久菌就越摇越稀,感觉像裂解了。检查噬菌斑也没有发现噬菌体污染,也尝试了各种培养基,也不行。不知各位有没有碰到过类似情况,该如何解决?

[ Last edited by quxd on 2013-10-31 at 12:16 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

acvhreinlg

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感染噬菌体概率不大吧

[ 发自小木虫客户端 ]
科研是将金钱转换为知识的过程,而创新则是将知识转换为金钱的过程。
8楼2013-11-01 07:51:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-31 13:27:44
IPTG对细胞有毒性,会抑制菌生长,浓度时多少?还有啥时候加的??一般在菌对数期加比较好。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-10-31 12:22:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangtailong

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-31 22:24:07
诱导时od不能太低,一般在对数期中后期,注意补料跟进,菌体自溶可能是缺乏氮源,摇瓶多转接几次看是否有自溶,菌种复壮后再试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-10-31 13:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quxd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2013-10-31 12:22:41
IPTG对细胞有毒性,会抑制菌生长,浓度时多少?还有啥时候加的??一般在菌对数期加比较好。。。

IPTG用的是0.1mM,OD在15-20的时候加的。是不是太老了?
4楼2013-10-31 22:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +25 慕绝cc 2026-04-09 29/1450 2026-04-14 16:45 by zhouxiaoyu
[考研] 297,工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +18 振—TZ 2026-04-10 19/950 2026-04-14 10:34 by screening
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 青岛科技大学材料学院,环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
信息提示
请填处理意见